| 溶葡萄球菌素的原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 张勃伟,孙薇薇,上官陶.溶葡萄球菌素的原核表达及多克隆抗体的制备[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(10):23-27. |
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| 作者姓名： | 张勃伟 孙薇薇 上官陶 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 生物工程研究所;西北农林科技大学 动物医学院;西北农林科技大学 生物工程研究所 |
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| 基金项目： | 国家科技部转基因新品种培育重大专项（2008ZX-08007-004） |
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| 摘 要： | 【目的】制备溶葡萄球菌素(lys)的多克隆抗体,为检测其在转基因细胞、胚胎及转基因动物中的表达奠定基础。【方法】以含有lys基因成熟肽序列的PEPB质粒为模板,经PCR扩增,构建pET28a-Ly原核表达载体,并以其转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达并纯化蛋白后,常规免疫家兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体效价,Western blot检测抗体的特异性。【结果】构建的原核表达载体pET28a-Ly经IPTG诱导6h后即可高效表达lys蛋白,蛋白经纯化后,其质量浓度可达到3.05mg/mL;抗体经ELISA检测,效价为1∶27 000,West-ern blot检测结果表明,抗体的特异性较好。【结论】成功构建了lys原核表达载体,所制备的lys多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性。
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| 关 键 词： | 溶葡萄球菌素 多克隆抗体 原核表达 |
| 收稿时间： | 2011/3/24 0:00:00 |
Prokaryotic expression of lysostaphin and preparation of its polyclonal antibody |
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| ZHANG Bo-weia,SUN Wei-weib,SHANGGUAN Taoa,HUANG Xina,ZHANG Yonga.Prokaryotic expression of lysostaphin and preparation of its polyclonal antibody[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(10):23-27. |
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| Authors: | ZHANG Bo-weia SUN Wei-weib SHANGGUAN Taoa HUANG Xina ZHANG Yonga |
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| Institution: | ZHANG Bo-weia,SUN Wei-weib,SHANGGUAN Taoa,HUANG Xina,ZHANG Yonga(a Institute of Biological Engineering,b College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lysostaphin polyclonal antibody prokaryotic expression |
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