| Asia Ⅰ型FMDV全衣壳蛋白基因在昆虫细胞中的表达与免疫活性分析 |
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| 引用本文： | 曹轶梅,孙甲川,卢曾军,孙普,郭建宏,刘在新.Asia Ⅰ型FMDV全衣壳蛋白基因在昆虫细胞中的表达与免疫活性分析[J].畜牧兽医学报,2009,40(1). |
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| 作者姓名： | 曹轶梅 孙甲川 卢曾军 孙普 郭建宏 刘在新 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点实验室,兰州730046 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划) |
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| 摘 要： | 将AsiaⅠ型FMDV全衣壳蛋白P12A基因插入到带有蜂毒溶血肽信号序列的杆状病毒转移载体pMel-Bac中，构建重组转移载体pMel-P12A。然后将含有目的基因的转移载体与线性化的杆状病毒DNA共转染Sf9细胞，获得重组杆状病毒。以感染复数（MOI）10的重组病毒感染Sf9细胞，72h后收获细胞，经Western blotting、间接免疫荧光检测，结果表明P12A基因在昆虫细胞中获得表达，相对分子质量约82ku，与预测蛋白大小一致，且能被FMDV阳性血清所识别。免疫荧光检测表明表达蛋白主要集中在细胞膜部分。夹心ELISA检测结果表明一部分表达蛋白分泌至培养基中，而有一部分蛋白仍在细胞中未能分泌。表达蛋白加入等量佐剂乳化后免疫豚鼠，间接ELISA检测结果表明豚鼠免疫后15d即产生了特异性FMDV抗体。本研究为空衣壳的体外组装及基因工程亚单位疫苗的研究进行了有益的探索。
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| 关 键 词： | FMDV 衣壳蛋白基因P12A 杆状病毒 Sf9细胞 表达 |
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