| 嗜吞噬无形体效应蛋白Ats-1调控宿主细胞剪接体转录机制的初步分析 |
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| 引用本文： | 李芮芮,史梦华,张妍,何洪琴,王雨璐,陈佳,王勇,陈创夫.嗜吞噬无形体效应蛋白Ats-1调控宿主细胞剪接体转录机制的初步分析[J].中国预防兽医学报,2024(1):39-48. |
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| 作者姓名： | 李芮芮 史梦华 张妍 何洪琴 王雨璐 陈佳 王勇 陈创夫 |
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| 作者单位： | 1. 石河子大学动物科技学院;2. 绵羊健康养殖与人兽共患病防控协同创新中心;3. 动物疾病防控兵团重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31760738)； |
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| 摘 要： | 为研究嗜吞噬无形体效应蛋白Ats-1对宿主细胞内蛋白表达的影响，并初步分析Ats-1对宿主细胞剪接体的调控机制，本研究将嗜吞噬无形体的Ats-1基因克隆后连接至pcDNA3.1质粒，构建pcDNA3.1-Ats-1重组质粒，经PCR和测序鉴定正确后利用脂质体LipofectamineTM3000将其转染HEK293T细胞，继续培养至24 h、48 h时经western blot鉴定，结果显示，在48 ku (全长蛋白)和35 ku (成熟蛋白)出现特异性条带，表明Ats-1蛋白在细胞内可正确表达；且相较于24 h,48 h Ats-1蛋白在细胞内的表达量显著增加(P<0.05)。将重组质粒pcDNA3.1-Ats-1和空质粒pcDNA3.1分别转染HEK293T细胞，48 h后收获细胞并裂解取裂解液，利用同量异位标签定量蛋白质组学方法(iTRAQ)筛选Ats-1表达后宿主细胞内差异显著表达的蛋白，并采用基因本体论(GO)分析差异显著表达蛋白的功能，利用京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库分析差异显著表达蛋白参与的信号通路。从剪接体通路选取34个差异表达...
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| 关 键 词： | Ats-1蛋白 iTRAQ 差异表达蛋白 剪接体 |
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