| 表达CSFV E2线性表位的PCV2病毒样颗粒的制备及免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 李岩岩,张帅,赵云环,任晓祥,李思琪,王文钊,左玉柱,范京惠.表达CSFV E2线性表位的PCV2病毒样颗粒的制备及免疫原性研究[J].中国预防兽医学报,2024(1):70-77. |
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| 作者姓名： | 李岩岩 张帅 赵云环 任晓祥 李思琪 王文钊 左玉柱 范京惠 |
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| 作者单位： | 1. 河北农业大学动物医学院;2. 河北省兽医生物技术创新中心 |
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| 基金项目： | 河北省现代农业产业技术体系建设专项资金(HBCT2024220201、HBCT2024220401)； |
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| 摘 要： | 为制备携带猪瘟病毒(CSFV) E2蛋白的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)，并在小鼠体内评价其免疫原性，本研究采用PCR扩增PCV2 Cap基因，利用重叠延伸PCR将PCV2 Cap蛋白的诱饵表位(aa169～aa180)替换成编码两个连续的CSFV E2蛋白线性表位(aa829～aa837)的融合基因(PCV2-Cap169～180-E2829～837)经测序鉴定正确后克隆至载体pET-32a(+)中，构建重组质粒p-Cap-E2并采用PCR方法鉴定正确后转化大肠杆菌BL21 (DE3)，经IPTG诱导表达重组蛋白(PCV2-Cap-E2)，采用改良的镍亲和层析法纯化重组蛋白，并利用SDS-PAGE与western blot对重组蛋白的表达形式及反应原性鉴定；利用透射电镜观察纯化的重组蛋白能否形成VLP；利用本研究制备的VLP、PCV2及CSFV商品化疫苗分别免疫小鼠，采用ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠体内的抗体水平及细胞因子含量。SDS-PAGE结果显示，在49 ku处出现目的条带，且重组蛋白主要以可溶性形式表达，纯化...
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 病毒样颗粒 猪瘟病毒E2蛋白 Cap蛋白 |
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