鸡毒支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 孙宇,苗立中,程立坤,赵家磊,赵修报,沈志强,王敬茹,李书光,余燕.鸡毒支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].动物医学进展,2024(4):64-68. |
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作者姓名: | 孙宇 苗立中 程立坤 赵家磊 赵修报 沈志强 王敬茹 李书光 余燕 |
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作者单位: | 1. 山东省滨州畜牧兽医研究院;2. 河南科技学院动物科技学院;3. 山东绿都生物科技有限公司;4. 滨城区畜牧兽医服务中心 |
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基金项目: | 国家重点研发计划项目(2023YFE0106100); |
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摘 要: | 为快速检测鸡毒支原体,根据鸡毒支原体的保守基因设计特异性引物和TaqMan探针,建立鸡毒支原体TaqMan实时荧光定量PCR方法并分析鸡毒支原体培养过程中颜色单位改变法(color change unit, CCU)和荧光定量PCR检测的相关性。结果显示,标准曲线y=-3.646x+44.208,相关系数R2=0.998,最低检测限度为1 copy/μL;与其他菌株等均无交叉反应;组内和组间变异系数均小于3%,表明该方法具有良好的稳定性和可重复性。用建立的实时荧光定量PCR检测方法对26份临床样品进行检测,该方法较普通PCR方法检出率更高。建立的荧光定量PCR与CCU显示鸡毒支原体在对数生长期时,两者具有一定的对应关系。表明建立了鸡毒支原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,可实现对鸡毒支原体的快速检测,为鸡毒支原体感染的防控提供技术基础。
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关 键 词: | 鸡毒支原体 TaqMan探针 荧光定量PCR |
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