猪急性腹泻综合征冠状病毒诱导细胞自噬并增强病毒复制的研究 |
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引用本文: | 曾苗苗,刘大凯,张记宇,张燎原,冯廷帅,杨小曼,时洪艳,张鑫,陈建飞,石达,冯力.猪急性腹泻综合征冠状病毒诱导细胞自噬并增强病毒复制的研究[J].中国预防兽医学报,2024(1):61-69. |
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作者姓名: | 曾苗苗 刘大凯 张记宇 张燎原 冯廷帅 杨小曼 时洪艳 张鑫 陈建飞 石达 冯力 |
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作者单位: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室/猪消化道传染病创新团队 |
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基金项目: | 国家重点研发计划(2021YFD1801105); |
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摘 要: | 为研究猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)感染细胞是否诱导自噬及自噬对病毒复制的影响,本研究将SADS-CoV (MOI 0.1)接种Vero E6细胞培养36 h后,经透射电子显微镜观察可见,SADS-CoV感染的细胞中出现了包裹胞浆的自噬体样双层膜结构,证实SADS-CoV可以诱导Vero E6细胞发生自噬。构建pEGFP-LC3的真核表达质粒并经双酶切及测序鉴定正确后转染Vero E6细胞,24 h后以SADS-CoV感染,24 h后经激光共聚焦显微镜观察可见,与阴性对照组细胞相比,感染SADS-CoV的细胞出现绿色荧光的点状聚集。进一步将SADS-CoV(MOI 0.1)感染Vero E6细胞不同时间后通过western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62表达水平的变化,结果显示,与阴性对照组相比,SADS-CoV感染组LC3-Ⅱ的表达水平升高,LC3-Ⅱ/GAPDH比值呈上升趋势,而p62蛋白表达水平则显著降低(P<0.05),表明SADS-CoV感染能够诱导Vero E6细胞产生完整的自噬应答。为了探究自噬对病毒复制的影响,本研究分别采用自噬抑制剂3-...
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关 键 词: | 猪急性腹泻综合征冠状病毒 自噬 病毒复制 LC3-Ⅱ |
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