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大肠杆菌多药耐药基因AcrA的克隆及其原核表达
引用本文:马红霞,邓旭明,阎继业,张英霞,欧阳红生.大肠杆菌多药耐药基因AcrA的克隆及其原核表达[J].兽医大学学报,2003,23(3):294-296.
作者姓名:马红霞  邓旭明  阎继业  张英霞  欧阳红生
作者单位:[1]吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118 [2]解放军军需大学动物科技系,吉林长春130062
摘    要:从大肠杆菌AcrA的编码序列中设计引物,以大肠杆菌基因组为模板,扩增出AcrA基因中约691bp的cDNA片段,将所得片段与pMD—18T载体连接,转化到DH5α大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒测序结果与文献报道一致。从阳性克隆中提取质粒,经HindⅢ和BamHI酶解,回收691bp的目的片段,定向克隆到pET—28a表达载体中,提取质粒,再次转化到BL21(DE3)中,成功地筛选出阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,通过SDS—PAGE检测出AcrA部分基因的表达。

关 键 词:大肠杆菌  耐药基因  AcrA基因  克隆  原核表达
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