| 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡巨噬细胞的差异转录基因文库构建 |
| |
| 引用本文： | 肖燕,安同庆,田志军,韦天超,姜一峰,彭金美,周艳君,仇华吉,童光志.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡巨噬细胞的差异转录基因文库构建[J].中国预防兽医学报,2009,31(1). |
| |
| 作者姓名： | 肖燕 安同庆 田志军 韦天超 姜一峰 彭金美 周艳君 仇华吉 童光志 |
| |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200232 |
| |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划) |
| |
| 摘 要： | 为鉴定高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN4株感染猪肺泡巨噬细胞(PAM)后,细胞内转录发生差异的基因,本研究采用抑制性消减杂交技术,以HP-PRRSV HuN4株感染后48 h的PAM细胞mRNA为实验方(Tester),以未感染的PAM细胞为驱动方(Driver)进行消减杂交,得到了HP-PRRSV HuN4株感染后PAM内转录后发生上调的基因.反之,实验方与驱动方互换进行消减杂交,得到了HP-PRRSV HuN4株感染后PAM内转录后发生下调的基因.将2种杂交所得的差异转录基因经PCR扩增后分别克隆到T载体中并转化大肠杆菌感受态细胞,从而构建了正向(上调)和反向(下调)的差异cDNA文库.随机挑取文库中的多个克隆用PCR方法进行鉴定,结果表明差异文库中的cDNA具有较好的多样性.本研究为下一步的文库克隆的序列测定与差异基因的功能分析奠定了基础.
|
| 关 键 词： | 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 抑制性消减杂交 差异基因 cDNA文库 |
Construction of subtraction library of porcine alveolar macrophages infected by highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus |
| |
| XIAO Yan,AN Tong-qing,TIAN Zhi-jun,WEI Tian-chao,JIANG Yi-feng,PENG Jin-mei,ZHOU Yan-jun,QIU Hua-ji,TONG Guang-zhi.Construction of subtraction library of porcine alveolar macrophages infected by highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(1). |
| |
| Authors: | XIAO Yan AN Tong-qing TIAN Zhi-jun WEI Tian-chao JIANG Yi-feng PENG Jin-mei ZHOU Yan-jun QIU Hua-ji TONG Guang-zhi |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
