| 鉴别H7N9流感病毒强毒和弱毒实时荧光RT-PCR方法的建立 |
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| 引用本文： | 蒋文明,李 阳,李金平,袁丽萍,侯广宇,程善菊,刘华雷.鉴别H7N9流感病毒强毒和弱毒实时荧光RT-PCR方法的建立[J].中国动物检疫,2019,36(4):58-63. |
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| 作者姓名： | 蒋文明 李 阳 李金平 袁丽萍 侯广宇 程善菊 刘华雷 |
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| 作者单位： | 中国动物卫生与流行病学中心 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2017YFC1200503） |
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| 摘 要： | 为建立可以区分H7N9流感病毒强毒株和弱毒株的方法,通过比对Gen Bank和GISAID中H7N9流感病毒的HA基因序列以及本实验室保存的病毒序列,设计1对特异性引物和2条探针,建立了区分H7N9流感病毒强弱毒株的实时荧光RT-PCR方法,同时对该方法的反应体系和反应参数进行优化,并开展特异性和敏感性试验以及临床应用试验。特异性试验显示,该方法具有良好的特异性,对其他常见亚型的禽流感病毒和其他禽病病毒检测均为阴性。敏感性试验显示,该方法对H7N9流感强毒和弱毒HA基因的检测下限分别为0.004 fg和0.1 fg RNA模板,高于两种商品化试剂盒的灵敏度。利用该方法对40株经实验室分离鉴定的H7N9流感病毒进行对比验证,发现检出率和符合率均为100%。结果表明,该方法具有特异、敏感、准确的优点,可用于H7N9流感病毒的快速检测,同时还可区分强弱毒株,对H7N9流感病毒,尤其是高致病性流感病毒的早期诊断和有效防控具有重要意义。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 H7N9 实时荧光RT-PCR 强毒株 弱毒株 |
Development of a Real-time RT-PCR Method for Identification of Virulent and Avirulent Strains of H7N9 Influenza Virus |
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| Jiang Wenming,Li Yang,Li Jinping,Yuan Liping,Hou Guangyu,Cheng Shanju,Liu Hualei.Development of a Real-time RT-PCR Method for Identification of Virulent and Avirulent Strains of H7N9 Influenza Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2019,36(4):58-63. |
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| Authors: | Jiang Wenming Li Yang Li Jinping Yuan Liping Hou Guangyu Cheng Shanju Liu Hualei |
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| Institution: | (China Animal Health and Epidemiology Center,National Avian Influenza Specialized Laboratory,Qingdao,Shandong 266032,China) |
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| Abstract: | Jiang Wenming;Li Yang;Li Jinping;Yuan Liping;Hou Guangyu;Cheng Shanju;Liu Hualei(China Animal Health and Epidemiology Center,National Avian Influenza Specialized Laboratory,Qingdao,Shandong 266032,China) |
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| Keywords: | avian influenza virus H7N9 real-time RT-PCR virulent strain avirulent strain |
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