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基因枪介导的转PYL5基因小麦的获得与鉴定
引用本文:池 青,周 鹏,刘香利,等.基因枪介导的转PYL5基因小麦的获得与鉴定[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2015,43(2):72-78.
作者姓名:池 青  周 鹏  刘香利  
作者单位:西北农林科技大学 生命科学学院,西北农林科技大学 旱区作物逆境生物学国家重点实验室,西北农林科技大学 生命科学学院,旱区作物逆境生物学国家重点实验室
基金项目:转基因生物新品种培育科技重大专项(2011ZX08002-004);国家自然科学基金项目(31101205);西北农林科技大学基本科研业务专项 (QN2011111);国家自然科学基金项目(31471482)
摘    要:【目的】通过基因枪介导共转化,获得转拟南芥抗旱基因PYL5的小麦植株,为转基因小麦的抗旱功能研究奠定基础。【方法】以小麦品种西农889、绵阳19和宁春16为供试材料,通过基因枪介导法将诱导型启动子Rd29A启动的PYL5基因和筛选标记基因Bar共转化到小麦幼胚愈伤组织中,经过除草剂PPT(Phosphinothricin)筛选和愈伤组织分化,获得再生植株。根据目标基因PYL5和Bar基因序列分别设计特异引物,对移栽成活的小麦T0代再生植株进行基因特异性PCR检测。【结果】采用基因枪分别轰击西农889的1800个、绵阳19的800个和宁春16的800个幼胚愈伤组织,经过筛选和分化分别获得了9,5和14株小麦再生植株;对转基因小麦T0代再生植株的基因特异性PCR检测结果表明,西农889、绵阳19和宁春16 Bar基因的转化率分别为0.280%,0.500%和0.750%,PYL5基因的转化率分别为0.110%,0.125%和0.500%,Bar和PYL5基因的共转化率分别为0.110%,0.125%和0.500%。【结论】PYL5基因成功转入到了小麦品种西农889、绵阳19和宁春16中。

关 键 词:小麦  基因枪法  共转化法  PYL5基因
收稿时间:2013/11/1 0:00:00

Transformation of wheat with PYL5 gene by biolistic particles and its molecular identification
CHI Qing;ZHOU Peng;LIU Xiang-li;Cheng Hui-hui;ZHAO Hui-xian.Transformation of wheat with PYL5 gene by biolistic particles and its molecular identification[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2015,43(2):72-78.
Authors:CHI Qing;ZHOU Peng;LIU Xiang-li;Cheng Hui-hui;ZHAO Hui-xian
Institution:CHI Qing;ZHOU Peng;LIU Xiang-li;Cheng Hui-hui;ZHAO Hui-xian;College of Life Sciences;State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas;
Abstract:
Keywords:wheat  biolistic particle  co-transformation  PYL5 gene
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