山羊子宫内膜基质细胞永生化研究 |
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引用本文: | 盛宏霞,吴庆侠,靳亚平,秦新喜,董海龙.山羊子宫内膜基质细胞永生化研究[J].畜牧兽医学报,2009,40(6). |
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作者姓名: | 盛宏霞 吴庆侠 靳亚平 秦新喜 董海龙 |
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作者单位: | 西北农林科技大学动物医学院,农业部家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室,杨凌,712100 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,西北农林科技大学青年骨干教师支持计划项目 |
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摘 要: | 将真核表达质粒pCI-neo-hTERT通过DNA转染技术导入山羊子宫内膜基质细胞(ESCs),筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定、生长特性及E2、P4等性腺激素的反应性测定.结果,传至2代的山羊ESCs经转染pCI-neo-hTERT,G418筛选2~3周后,抗性克隆形成,滤纸片法转移,扩增并连续培养,共获得5个细胞克隆,扩大培养后的细胞呈典型的长梭形和三角形,相互平行排列成束,与原代培养形态一致.转染后细胞有较高的端粒酶活性,细胞增殖加速,传代时间缩短,传至50代仍稳定增殖.波形蛋白枪测阳性,角蛋白检测阴性,具有转染前山羊子宫内膜基质细胞特性.雌激素(100 nmol·L-1)和少量孕激素(10 nmol·L-1)对转染后基质细胞增殖有促进作用.获得了永生化的ESCs,为子宫内膜细胞体外研究奠定了基础.
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关 键 词: | 山羊 子宫内膜基质细胞 永生化细胞 |
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