| 禽网状内皮组织增生症病毒env基因的原核表达及其多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 李凯,高宏雷,祁小乐,高玉龙,高立,邓小芸,王笑梅.禽网状内皮组织增生症病毒env基因的原核表达及其多克隆抗体制备[J].中国预防兽医学报,2010,32(10). |
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| 作者姓名： | 李凯 高宏雷 祁小乐 高玉龙 高立 邓小芸 王笑梅 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,禽传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 现代农业肉鸡产业技术体系建设 |
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| 摘 要： | 为原核表达禽网状内皮组织增生症病毒(REV)env蛋白及制备抗env蛋白的高效价多克隆抗体,本研究以pMD18T-env(HLJR0901株)为模板,扩增得到REV的env全长基因,将其克隆于pET-32a(+)中。将阳性重组质粒pET-env转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达。利用亲和层析纯化重组蛋白,复性后免疫BALB/c小鼠,制备抗env多克隆血清。SDS-PAGE及western blot结果表明,env基因以融合蛋白形式获得正确表达,相对分子质量约为84ku,表达产物具有良好免疫原性;IFA结果显示,制备的抗env多克隆血清能与REV野毒株特异性反应;ELISA效价达到1∶105以上。该研究为REV的检测及env蛋白的深入研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 禽网状内皮组织增生症病毒 env基因 原核表达 纯化 多克隆抗体 |
Prokaryotic expression of the recombinant env protein of reticuloendotheliosis virus and the polyclonal antibodies preparation |
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| LI Kai,GAO Hong-lei,QI Xiao-le,GAO Yu-long,GAO Li,DENG Xiao-yun,WANG Xiao-mei.Prokaryotic expression of the recombinant env protein of reticuloendotheliosis virus and the polyclonal antibodies preparation[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(10). |
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| Authors: | LI Kai GAO Hong-lei QI Xiao-le GAO Yu-long GAO Li DENG Xiao-yun WANG Xiao-mei |
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