| 花生AhGPAT9与AhLPAAT4基因的原核表达及Western Blot分析 |
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| 引用本文： | 杨珍,郝翠翠,李昊远,焦坤,王通,王冕,陈娜,陈明娜,潘丽娟,姜焕焕,禹山林,迟晓元.花生AhGPAT9与AhLPAAT4基因的原核表达及Western Blot分析[J].花生学报,2017,46(3). |
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| 作者姓名： | 杨珍 郝翠翠 李昊远 焦坤 王通 王冕 陈娜 陈明娜 潘丽娟 姜焕焕 禹山林 迟晓元 |
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| 作者单位： | 1. 山东省花生研究所,山东青岛,266100;2. 山东省花生研究所,山东青岛266100;青岛科技大学海洋科学与生物工程学院,山东青岛266042;3. 山东省花生研究所,山东青岛266100;哈尔滨工业大学(威海)海洋科学与技术学院,山东威海264209;4. 山东省花生研究所,山东青岛266100;哈尔滨工业大学市政环境工程学院,黑龙江哈尔滨150001 |
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| 基金项目： | 2014年国家“万人计划”青年拔尖人才，国家花生产业技术体系项目，山东省自然科学基金项目，国家自然科学基金项目，山东省农业科学院青年科研基金项目，青岛市应用基础研究项目，青岛市民生计划项目，山东农业科学院农业科技创新项目，山东省农业科学院青年英才培养计划 |
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| 摘 要： | 酰基转移酶基因家族是甘油三酯合成的关键基因。本研究以前期克隆的AhGPAT9与AhLPAAT4基因部分序列设计引物,构建原核表达载体,转化进大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE检测表明,重组蛋白在37℃,5h诱导条件下获得高效表达。重组蛋白经纯化和富集,对新西兰兔进行4次免疫,纯化获得的多克隆抗血清,通过间接ELISA检测,表明获得了效价比较高的多克隆抗体。通过对重组蛋白纯化后样品进行Western Blot分析,结果显示在纯化样品相应位置有明显信号,表明所制备的抗体具有很高灵敏度和特异性。并采用制备的抗体对AhGPAT9与AhLPAAT4蛋白在花生不同组织及种子不同发育时期的表达进行了Western Blot分析。为深入研究AhGPAT9与AhLPAAT4基因的功能提供了科学数据。
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| 关 键 词： | 花生 AhGPAT9 AhLPAAT4 原核表达 多克隆抗体 蛋白质免疫印记法 |
Prokaryotic Expression and Western Blot of AhGPAT9 and AhLPAAT4 of Peanut |
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| YANG Zhen,HAO Cui-cui,LI Hao-yuan,JIAO Kun,WANG Tong,WANG Mian,CHEN Na,CHEN Ming-na,PAN Li-juan,JIANG Huan-huan,YU Shan-lin,CHI Xiao-yuan.Prokaryotic Expression and Western Blot of AhGPAT9 and AhLPAAT4 of Peanut[J].Journal of Peanut Science,2017,46(3). |
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| Authors: | YANG Zhen HAO Cui-cui LI Hao-yuan JIAO Kun WANG Tong WANG Mian CHEN Na CHEN Ming-na PAN Li-juan JIANG Huan-huan YU Shan-lin CHI Xiao-yuan |
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