| 鸡催乳素和抑制素-α亚基重组蛋白的构建及表达 |
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| 引用本文： | 刘颖,施振旦,黄运茂,于迎春,张细权,张贵学.鸡催乳素和抑制素-α亚基重组蛋白的构建及表达[J].中国兽医学报,2002,22(4):365-367. |
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| 作者姓名： | 刘颖 施振旦 黄运茂 于迎春 张细权 张贵学 |
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| 作者单位： | 1. 东北农业大学,动物科学技术学院,黑龙江,哈尔滨,150030
2. 华南农业大学,动物科学学院,广东,广州,510642 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (3 970 0 10 2 )，广东省自然科学基金资助项目 (970 0 13 [粤科基 (1997) 2 3 ] ) |
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| 摘 要： | 将鸡催乳素 (PRL)和抑制素 - α亚基 (INB- α)基因编码序列重组为融合基因 ,制备了同时包含这 2种激素基因的融合蛋白。通过 PCR和分子克隆的方法首先将全部粤黄鸡 PRL成熟肽 c DNA克隆到载体 p RSET A的 Bgl 和 Eco R 克隆位点之间 ,获得重组质粒 p PRL- RSET。鸡 INB- α片段经扩增后分别被克隆到质粒 p RSET A和 p PRL- RSET的 Nhe 和 Xho 克隆位点之间 ,获得重组质粒 p INB- RSET和 p INB- PRL。以上重组质粒构建的正确性分别由各特定引物组合扩增的 PCR产物长度、特定限制性内切酶消化各重组质粒所得产物长度以及对各质粒的测序结果得到验证。重组质粒 p PRL- RSET和 p INB- PRL 转化 E.coli BL2 1(DE3)株 ,IPTG诱导后所表达的产物经 SDS- PAGE显示 ,其分别与所预期的重组蛋白分子大小相符。质粒 p PRL - RSET和 p INB- PRL的表达产物和用 Ni- NTA凝胶纯化的 2重组蛋白产物都可与抗鸡 PRL 抗体产生特异的免疫印迹 ,并且表达菌裂解液和相应纯化蛋白的免疫印迹处于同一位置。结果说明 ,试验已成功完成了鸡 PRL、INB-α及 2者融合蛋白的构建、表达和纯化
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| 关 键 词： | 鸡 PRL INB-α 重组基因 融合蛋白 |
| 文章编号： | 1005-4545(2002)04-0365-03 |
| 修稿时间： | 2001年12月6日 |
Construction and Expression of Recombinant Proteins Based on Chicken Prolactin and Inhibin α Subunit Fragment |
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| LIU Ying ,SHI Zhen dan ,HUANG Yun mao ,YU Ying chun ,ZHANG Xi quan ,ZHANG Gui xue.Construction and Expression of Recombinant Proteins Based on Chicken Prolactin and Inhibin α Subunit Fragment[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2002,22(4):365-367. |
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| Authors: | LIU Ying SHI Zhen dan HUANG Yun mao YU Ying chun ZHANG Xi quan ZHANG Gui xue |
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| Institution: | LIU Ying 2,SHI Zhen dan 1,HUANG Yun mao 1,YU Ying chun 1,ZHANG Xi quan 1,ZHANG Gui xue 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | INB-a |
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