| 新型高产β-胡萝卜素巴斯德毕赤酵母表达宿主菌的构建 |
| |
| 引用本文： | 张祺珮,李雅楠,孟昆,柏映国,黄火清,罗会颖.新型高产β-胡萝卜素巴斯德毕赤酵母表达宿主菌的构建[J].中国农业科技导报,2018,20(2):48-55. |
| |
| 作者姓名： | 张祺珮 李雅楠 孟昆 柏映国 黄火清 罗会颖 |
| |
| 作者单位： | 1.中国农业科学院饲料研究所, 北京 100081; 2.广州医科大学生命科学学院, 广州 510006 |
| |
| 基金项目： | 国家863计划项目（2014AA021301）资助。 |
| |
| 摘 要： | 分泌型巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）作为高效表达宿主菌已被广泛应用，通过高密度培养工艺用于多种酶制剂(如植酸酶、甘露聚糖酶等)的规模生产。然而，在生产过程中产生的大量菌体利用率低，多数被废弃掩埋，或只能作为廉价的菌体蛋白，造成大量的资源浪费。为提高酵母发酵副产物的利用率，向毕赤酵母宿主菌GS115中导入来源于红发夫酵母（Xanthophyllomyces dendrorhous）β-胡萝卜素合成途径中的关键基因(idi、crtE、crtYB和crtI)，获得了胞内高产β-胡萝卜素的工程菌株P. pastoris GS115-CARO，实现工业生产中的菌体蛋白的高附加值利用。同时以来源于嗜热篮状菌（Talaromyces leycettanus JCM12802）的甘露聚糖酶基因Man5T作为参照，验证了宿主菌P. pastoris GS115和P. pastoris GS115-CARO在表达外源蛋白的差异。结果表明：Man5T基因的导入并没有影响，两株宿主菌的甘露聚糖酶表达量（分别为280 U/mL和286 U/mL，P>005），但宿主菌P. pastoris GS115-CARO胞内β-胡萝卜素产量高达到31.27 mg/g(菌体干重dry cell weight,dcw)。构建的工程菌株不仅可以实现外源酶制剂的高效表达，有效地提升酵母菌体资源的利用价值,同时也在一定程度上了解决了发酵菌体对环境的污染问题。
|
| 关 键 词： | 毕赤酵母 红发夫酵母 β-胡萝卜素 甘露聚糖酶 |
| 收稿时间： | 2017-03-07 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国农业科技导报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国农业科技导报》下载免费的PDF全文 |
|
