亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其免疫活性的初步分析 |
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引用本文: | 董金杰,王永录,张永光,伏小平,潘丽,方玉珍,蒋守田,王宝琴,王文秀.亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其免疫活性的初步分析[J].中国兽医科技,2005,35(6):461-464. |
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作者姓名: | 董金杰 王永录 张永光 伏小平 潘丽 方玉珍 蒋守田 王宝琴 王文秀 |
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作者单位: | [1]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070//中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046 [3]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070 [4]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095 [5]西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100 |
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摘 要: | 提取亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒总RNA,用特异性引物通过RT—PCR反应获得了约750bp的核酸片段,将其与pGEM—T Easy载体连接,并转化大肠埃希氏菌JM109。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序,证明所克隆的片段含有完整的VP1基因;将重组质粒与表达载体pcDNA3.1( )分别用Barn HⅠ和Eco RⅠ双酶切后连接,构建成重组表达质粒,转化宿主菌DH5α,筛选阳性克隆。测序结果证明,目的基因正确插入到表达载体中,命名为pcDNAV;用同样方法将IL-18基因插入pcDNAV中,命名为pcDNAVI。用pcDNAVI免疫豚鼠,2周后加强免疫1次,每周用ELISA检测豚鼠血清中的抗体水平。结果表明,pcDNA VI可引发机体产生体液免疫。
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关 键 词: | 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒 VP1基因 真核表达载体 免疫活性 体液免疫 口蹄疫 核酸疫苗 |
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