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3种亚群PCV-2感染性克隆的构建及体内外感染性
引用本文:李薇,罗维,余兴龙,李润成,白霞,葛猛,王亚,向卫军,李晶.3种亚群PCV-2感染性克隆的构建及体内外感染性[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2011,37(1).
作者姓名:李薇  罗维  余兴龙  李润成  白霞  葛猛  王亚  向卫军  李晶
作者单位:湖南农业大学,动物医学院,湖南,长沙,410128
基金项目:国家自然科学基金面上项目
摘    要:通过PCR扩增出猪圆环病毒2(PCV-2)3个亚群(1A、1B、1C)毒株的全基因组DNA序列,并分别克隆入pMD-18T载体,获得含有PCV-2全基因组的3个重组质粒,分别命名为RP8(1A)、P0(1B)和P4-1(1C).将3个重组质粒分别用SacⅡ切出1767 bp的PCV-2全基因组,并在体外分别用T4连接酶连接而环化.用脂质体将3种自身环化的基因组转染无PCV-1污染的PK-15细胞,并按常规病毒培养方法分别传代,第5代细胞培养物分别用间接免疫荧光试验(IFA)及PCR方法检测转染的细胞,检测结果均为阳性,说明已获得PCV-2共3个亚群1A、1B、1C的感染性克隆.用1A、1B、1C感染性克隆的第5代细胞培养物分别接种小鼠,可在接种小鼠的血液中分别检测到相应PCV-2亚型的基因组DNA,表明本试验构建的自身环化的1A、1B、1C亚型的PCV-2的全基因组DNA在体内、体外均具有感染性.

关 键 词:猪圆环病毒2  感染性克隆  基因亚群  毒力

Construction of an infectious molecular clone of three kinds of subgroups of PCV-2 and its in vitro and in vivo experimental infection
LI Wei,LUO Wei,YU Xing-long,LI Run-cheng,BAI Xia,GE Meng,WANG Ya,XIANG Wei-jun,LI Jing.Construction of an infectious molecular clone of three kinds of subgroups of PCV-2 and its in vitro and in vivo experimental infection[J].Journal of Hunan Agricultural University,2011,37(1).
Authors:LI Wei  LUO Wei  YU Xing-long  LI Run-cheng  BAI Xia  GE Meng  WANG Ya  XIANG Wei-jun  LI Jing
Abstract:
Keywords:
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