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棉铃虫羧酸酯酶基因HaCarE序列分析及其RNAi效应
引用本文:李海超,楚冬冬,韩心怡,原国辉,苗雪霞,关若冰.棉铃虫羧酸酯酶基因HaCarE序列分析及其RNAi效应[J].植物保护学报,2023,50(3):602-609.
作者姓名:李海超  楚冬冬  韩心怡  原国辉  苗雪霞  关若冰
作者单位:河南农业大学植物保护学院, 郑州 450002;中国科学院分子植物科学卓越创新中心, 昆虫发育与进化生物学重点实验室, 上海 200032
基金项目:国家自然科学基金 (31772520), 上海市科技兴农技术创新项目 (2019-02-08-00-12-F01125), 河南省重点研发与推广专项 (科技攻关)(212102110442), 河南省高等学校重点科研项目 (21A210017), 河南省青年人才托举工程项目 (2020HYTP038)
摘    要:为明确棉铃虫Helicoverpa armigera羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)编码基因的功能及其RNA干扰(RNA interfering,RNAi)效应,通过棉铃虫转录组数据筛选获得CarE基因,并克隆得到其全长cDNA序列,对其进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(quantitative real-timePCR,qPCR)技术检测该基因在棉铃虫不同发育时期和不同组织中的表达水平,同时通过RNAi技术检测其对棉铃虫的致死效果。结果表明,从棉铃虫中克隆获得的HaCarE基因全长cDNA序列为1 677 bp,编码558个氨基酸,编码蛋白质由15个α螺旋和14个β折叠结构组成。qPCR检测结果显示该基因在棉铃虫不同发育时期均有表达,其中在1龄幼虫期的相对表达量最高,随着龄期的增长,相对表达量逐渐降低,在6龄幼虫期和蛹期的相对表达量最低;在5龄幼虫不同组织中,该基因在中肠中的相对表达量最高。注射dsHaCarE能够明显抑制靶标基因的表达,24 h抑制率为75.41%;饲喂dsHaCarE对棉铃虫2龄幼虫有显著致死作用,5 d时死亡率为64.57%,体长与对照组相比减少了23.29%。表明获得的HaCarE基因对棉铃虫生长发育有显著抑制作用,并有较好的致死效果。

关 键 词:棉铃虫  羧酸酯酶  基因克隆  时空表达  RNA干扰
收稿时间:2021/10/9 0:00:00

Sequence analysis and RNAi of carboxylesterase gene HaCarE in cotton bollworm Helicoverpa armigera
Li Haichao,Chu Dongdong,Han Xinyi,Yuan Guohui,Miao Xuexi,Guan Ruobing.Sequence analysis and RNAi of carboxylesterase gene HaCarE in cotton bollworm Helicoverpa armigera[J].Acta Phytophylacica Sinica,2023,50(3):602-609.
Authors:Li Haichao  Chu Dongdong  Han Xinyi  Yuan Guohui  Miao Xuexi  Guan Ruobing
Institution:College of Plant Protection, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, Henan Province, China;Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Center for Excellence in Molecular Plant Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China
Abstract:
Keywords:Helicoverpa armigera  carboxylesterase  gene cloning  spatiotemporal expression  RNA interference
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