| 芥菜开花调控蛋白SVP 与FLC 酵母表达载体的构建及其相互作用研究 |
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| 引用本文： | 汤青林,李念祖,丁宁,陈竹睿,宋明,王志敏.芥菜开花调控蛋白SVP 与FLC 酵母表达载体的构建及其相互作用研究[J].园艺学报,2012,39(6):1175-1182. |
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| 作者姓名： | 汤青林 李念祖 丁宁 陈竹睿 宋明 王志敏 |
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| 作者单位： | （西南大学园艺园林学院，南方山地园艺学教育部重点实验室，重庆市蔬菜学重点实验室，重庆 400715） |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划‘973’项目，国家自然科学基金项目，重庆市自然科学基金项目，中央高校基本科研业务费专项 |
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| 摘 要： | 为深入研究芥菜开花信号整合子的两个核心调节因子SHORT VEGETATIVE PHASE（SVP）与FLOWERING LOCUS C（FLC）相互作用的分子机理，通过PCR扩增，从芥菜材料‘QJ’中分别克隆含EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切位点的SVP和FLC编码区全长，并利用酵母双杂交体系，将FLC与GAL4报告基因DNA 激活域融合（pGADT7FLC），SVP与GAL4报告基因DNA 结合域融合（pGBKT7SVP）。两种重组质粒分别转化酵母Y187和Y2HGold后未出现自激活和毒性现象。融合的二倍体酵母（pGADT7FLC × pGBKT7SVP）能在选择性固体培养基QDO/X/A（SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal/AbA）上生长，并且菌落呈蓝色。将诱饵质粒（pGBKT7SVP）与猎物质粒（pGADT7FLC）载体互换（pGADT7SVP、pGBKT7FLC），再次转化酵母后仍能融合成二倍体酵母（pGADT7SVP × pGBKT7FLC），并同时激活报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1，由此表明SVP与FLC蛋白能够相互结合。
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| 关 键 词： | 芥菜 SVP FLC 酵母双杂交 |
Determination of Interactions Between SVP and FLC in Brassica juncea Coss. by Yeast Two-Hybrid System |
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| TANG Qing-lin,LI Nian-zu,DING Ning,CHEN Zhu-rui,SONG Ming,and WANG Zhi-min.Determination of Interactions Between SVP and FLC in Brassica juncea Coss. by Yeast Two-Hybrid System[J].Acta Horticulturae Sinica,2012,39(6):1175-1182. |
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| Authors: | TANG Qing-lin LI Nian-zu DING Ning CHEN Zhu-rui SONG Ming and WANG Zhi-min |
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| Institution: | （College of Horticulture and Landscape Architecture，Southwest University，Key Laboratory of Horticulture Science for Southern Mountainous Regions，Ministry of Education，Key Laboratory of Olericulture，Chongqing 400715，China） |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Brassicajuncea SVP FLC yeast two-hybrid system |
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