| 鸡内参基因β-actin和GAPDH实时定量PCR重组质粒标准品的构建 |
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| 引用本文： | 陈欣虹,钱琨,郁川,田野,秦爱建.鸡内参基因β-actin和GAPDH实时定量PCR重组质粒标准品的构建[J].中国家禽,2011,33(10). |
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| 作者姓名： | 陈欣虹 钱琨 郁川 田野 秦爱建 |
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| 作者单位： | 扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室,江苏扬州,225009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，"863"课题，江苏省高校自然科学重大基础研究项目 |
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| 摘 要： | 本研究从SPF鸡皮肤中提取总RNA,并反转录为cDNA;以该cDNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)分别扩增出看家基因β-actin和GAPDH,将PCR产物连入pGEM-T easy载体,转化DH5α菌,经蓝白斑筛选和质粒酶切鉴定和DNA含量测定,得到定量的β-actin和GAPDH基因融合的重组质粒(pGEM T-actin和pGEM T-GAPDH),即实时定量PCR内参标准品.构建成功的标准品经10倍梯度稀释,作为模板,获得扩增效率良好及可信度高的标准曲线.构建成功的标准品可大量制备,可用于鸡的靶基因定量PCR所需的内参标准品.
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| 关 键 词： | 内参基因 实时定量PCR 标准品 标准曲线 |
Construction of the Standard Plasmids of Chicken β-actin/GAPDH for Real Time PCR |
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| CHEN Xinhong,QIAN Kun,YU Chuan,TIAN Ye,QIN Aijian.Construction of the Standard Plasmids of Chicken β-actin/GAPDH for Real Time PCR[J].China Poultry,2011,33(10). |
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| Authors: | CHEN Xinhong QIAN Kun YU Chuan TIAN Ye QIN Aijian |
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| Institution: | CHEN Xinhong,QIAN Kun,YU Chuan,TIAN Ye,QIN Aijian (Key Laboratory of Preventive Veterinary Medicine of Jiangsu Province,College of Veterinary Medicine,Yangzhou University,Yangzhou,Jiangsu 225003) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | reference genes real time quantitative PCR standards standard curves |
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