| 单核细胞增生李斯特菌qPCR检测方法的建立及应用 |
| |
| 引用本文： | 刘洪蕾,程如楠,李磊,甄思慧,王瑜,武周慧,王少华,王真.单核细胞增生李斯特菌qPCR检测方法的建立及应用[J].北京农学院学报,2023(1):45-52. |
| |
| 作者姓名： | 刘洪蕾 程如楠 李磊 甄思慧 王瑜 武周慧 王少华 王真 |
| |
| 作者单位： | 1. 北京农学院动物科学技术学院;2. 河北北方学院 |
| |
| 基金项目： | 北京市优秀人才培养资助项目(2017000026833ZK18)；;北京农学院青年科学基金(QNKJ202107)； |
| |
| 摘 要： | 【目的】为了建立一种快速、准确、可靠的畜产品中单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测方法。【方法】根据保守序列设计并筛选出一对特异性引物，经过反应体系及程序优化，建立染料法qPCR检测方法，并使用临床样品评价该检测方法的效果。【结果】建立的qPCR方法特异性较好，扩增，对纯培养细菌的检测限可达到102 CFU/mL,检测方法变异系数小，稳定性高；对生猪肉和牛奶人工污染模型中的检测限为103 CFU/mL,比普通PCR灵敏度高10倍。使用qPCR分别对50份牛奶样品和生猪肉样品检测，阳性率均为2.00%,与普通PCR方法验证结果一致。【结论】成功建立一种特异性强、敏感性高、稳定性良好的绝对定量检测单核细胞增生李斯特菌的荧光定量PCR方法，可以用于临床样品单核细胞增生李斯特菌的检测。
|
| 关 键 词： | 单核细胞增生李斯特菌 检测技术 荧光定量PCR |
|
|
