| ‘白天堂’百合原生质体的分离纯化与培养 |
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| 引用本文： | 李炆岱,张琪,王英姿,刘思泱,赵祥云,王文和.‘白天堂’百合原生质体的分离纯化与培养[J].北京农学院学报,2023(1):76-81. |
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| 作者姓名： | 李炆岱 张琪 王英姿 刘思泱 赵祥云 王文和 |
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| 作者单位： | 1. 北京农学院园林学院 |
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| 基金项目： | 内蒙古自治区人才开发基金项目； |
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| 摘 要： | 【目的】探究百合原生质体分离纯化和培养条件，为百合原生质体融合、再生体系建立、转基因育种等研究奠定基础。【方法】以‘白天堂’百合无菌苗叶片为材料，采用纤维素酶、果胶酶和离析酶组合分离原生质体，采取单因素试验法，对影响原生质体的制备及再生条件的主要因素即渗透压、酶解组合、细胞筛和酶解时间进行筛选与优化。【结果】以百合无菌苗叶片在1.0%纤维素酶+0.5%离析酶+0.1%果胶酶+0.6 mol/L甘露醇+10.0 mmol/L CaCl2·2H2O+20.0 mmol/L MES+20.0 mmol/L KCl混合酶解液为最优条件，25℃,25 r/min, pH为5.6黑暗酶解6 h;孔径75μm细胞筛过滤，600 r/min离心5 min收集细胞，原生质体产量可达6.4×105个/mL,原生质体活力为78.0%;将纯化后密度为1×105个/mL的原生质体溶液接种在葡萄糖作为唯一碳源的培养基中可以存活，并生长产生细胞壁，但没有启动细胞分裂和诱导形成愈伤组织。【结论】初步建立‘白天堂’百合的高效原生质体...
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| 关 键 词： | 百合 原生质体 分离 纯化 培养 |
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