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溶藻弧菌诱导马氏珠母贝血淋巴cDNA差减文库的构建及分析
引用本文:王忠良,简纪常,鲁义善,王蓓,陈刚,吴灶和.溶藻弧菌诱导马氏珠母贝血淋巴cDNA差减文库的构建及分析[J].水产学报,2014,38(1):127-135.
作者姓名:王忠良  简纪常  鲁义善  王蓓  陈刚  吴灶和
作者单位:广东海洋大学水产学院, 广东 湛江 524088;广东海洋大学南海水产经济动物增养殖重点实验室, 广东 湛江 524088;广东海洋大学水产学院, 广东 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 广东 湛江 524088;广东海洋大学水产学院, 广东 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 广东 湛江 524088;广东海洋大学水产学院, 广东 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 广东 湛江 524088;广东海洋大学水产学院, 广东 湛江 524088;广东海洋大学南海水产经济动物增养殖重点实验室, 广东 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 广东 湛江 524088;仲恺农业工程学院, 广东 广州 510225
基金项目:国家自然科学基金项目(31202023)
摘    要:为了探讨马氏珠母贝免疫防御机制,筛选免疫防御相关功能基因,以致病性溶藻弧菌人工感染的马氏珠母贝血淋巴为材料,采用抑制性差减杂交(SSH)技术,构建了溶藻弧菌诱导的马氏珠母贝血淋巴cDNA差减文库;以马氏珠母贝管家基因β-actin作为差减指标检测该文库的差减效率;对选取的600个阳性克隆进行测序及生物信息学分析。结果显示,该文库的差减效率可达210倍;PCR阳性检测显示差减片段为100~750 bp,对随机挑取600个克隆的测序结果显示,共获得414个有效EST序列;通过BLAST同源性比对,有167个EST序列(占40.34%)与NCBI数据库中已知功能蛋白质具较高同源性,其中7个EST序列(占1.69%)与免疫防御相关基因同源;此外,204个EST(占49.28%)在数据库中未发现同源序列。研究表明,SSH技术能有效富集马氏珠母贝血淋巴差异表达基因,研究结果为探索马氏珠母贝免疫基因作用机理和调控机制奠定了基础。

关 键 词:马氏珠母贝  溶藻弧菌  抑制性消减杂交  cDNA文库
收稿时间:6/6/2013 12:00:00 AM
修稿时间:2013/11/12 0:00:00

Analysis of differentially expressed genes in response to Vibrio alginolyticus stimulation in hemocytes of pearl oyster (Pinctada fucata)
WANG Zhongliang,JIAN Jichang,LU Yishan,WANG Bei,CHEN Gang and WU Zaohe.Analysis of differentially expressed genes in response to Vibrio alginolyticus stimulation in hemocytes of pearl oyster (Pinctada fucata)[J].Journal of Fisheries of China,2014,38(1):127-135.
Authors:WANG Zhongliang  JIAN Jichang  LU Yishan  WANG Bei  CHEN Gang and WU Zaohe
Institution:Fisheries College, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Key Laboratory of Aquaculture in South China Sea for Aquatic Economic Animal, Regular High Education Institute of Guangdong Province, Zhanjiang 524088, China;Fisheries College, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China;Fisheries College, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China;Fisheries College, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China;Fisheries College, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Key Laboratory of Aquaculture in South China Sea for Aquatic Economic Animal, Regular High Education Institute of Guangdong Province, Zhanjiang 524088, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China;Zhongkai University of Agriculture and Engineering, Guangzhou 510225, China
Abstract:
Keywords:Pinctada fucata  Vibrio alginolyticus  SSH  cDNA library
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