| 奶牛结核病IFN-γ基因的克隆及其在E.coli BL21(DE3)中的高效表达 |
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| 引用本文： | 豆玲,豆思远,周峰,王佳,尚立宏,曹丽萍,鄂承钧.奶牛结核病IFN-γ基因的克隆及其在E.coli BL21(DE3)中的高效表达[J].畜牧兽医杂志,2015,34(1):18-21. |
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| 作者姓名： | 豆玲 豆思远 周峰 王佳 尚立宏 曹丽萍 鄂承钧 |
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| 作者单位： | 甘肃省动物疫病预防控制中心,甘肃兰州,730046 |
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| 基金项目： | 甘肃省农业科技创新项目 |
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| 摘 要： | 动物机体内γ-干扰素(IFN-γ)是可被多种物质诱导产生的生物活性蛋白,克隆和诱导表达奶牛结核病IFN-γ蛋白,对于采用ELISA诊断牛结核病有着重要意义。本研究利用RT-PCR方法克隆了奶牛结核病IFN-γ基因,并成功构建了IFN-γ基因的原核表达载体重组质粒pET28a-IFN-γ,转入E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,并对条件进行了优化。SDS-PAGE与Western Blot结果显示,在37℃条件下,0.75mmol/L IPTG诱导4h可见重组蛋白BovIFN-γ大量表达。本研究成功建立了利用原核表达系统获得牛IFN-γ蛋白的方法,对后续利用该蛋白作为免疫原,从而建立ELISA诊断方法奠定了基础。
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| 关 键 词： | 奶牛 结核病 IFN-γ基因 原核表达 |
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