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柑橘CitSERK基因正义与反义表达载体的构建及其体系优化
引用本文:凡改恩,刘永忠,郭文武.柑橘CitSERK基因正义与反义表达载体的构建及其体系优化[J].现代农业科技,2008(14).
作者姓名:凡改恩  刘永忠  郭文武
作者单位:1. 浙江省柑橘研究所,浙江台州,318020
2. 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室
摘    要:以Kpn I和XhoI双酶切带有CitSERK基因cDNA全序列的T/A克隆载体,同时以Kpn I和XhoI双酶切PMV载体,凝胶回收目的基因片段及PMV载体骨架片段,成功构建了CitSERK基因正义与反义表达载体,并对遗传转化载体构建体系进行了优化。结果表明:以Kpn I和XhoI双酶切带有CitSERK基因的T/A克隆载体和PMV载体,成功得到带有Kpn I和XhoI双酶切位点的目的基因片段和PMV载体骨架片段;酶切检测结果显示,阳性克隆成功酶切出预期大小的CitSERK基因片段和PMV载体骨架片段;2对特异引物PCR检测结果显示,阳性克隆同时扩增出预期大小的CitSERK基因片段。

关 键 词:柑橘  CitSERK  载体构建  体系优化
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