柑橘CitSERK基因正义与反义表达载体的构建及其体系优化 |
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引用本文: | 凡改恩,刘永忠,郭文武.柑橘CitSERK基因正义与反义表达载体的构建及其体系优化[J].现代农业科技,2008(14). |
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作者姓名: | 凡改恩 刘永忠 郭文武 |
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作者单位: | 1. 浙江省柑橘研究所,浙江台州,318020 2. 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室 |
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摘 要: | 以Kpn I和XhoI双酶切带有CitSERK基因cDNA全序列的T/A克隆载体,同时以Kpn I和XhoI双酶切PMV载体,凝胶回收目的基因片段及PMV载体骨架片段,成功构建了CitSERK基因正义与反义表达载体,并对遗传转化载体构建体系进行了优化。结果表明:以Kpn I和XhoI双酶切带有CitSERK基因的T/A克隆载体和PMV载体,成功得到带有Kpn I和XhoI双酶切位点的目的基因片段和PMV载体骨架片段;酶切检测结果显示,阳性克隆成功酶切出预期大小的CitSERK基因片段和PMV载体骨架片段;2对特异引物PCR检测结果显示,阳性克隆同时扩增出预期大小的CitSERK基因片段。
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关 键 词: | 柑橘 CitSERK 载体构建 体系优化 |
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