| 同时检测美洲型及欧洲型PRRSV的多重RT-PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 施开创,莫胜兰,张步娴,屈素洁,赵日浪,钟诚.同时检测美洲型及欧洲型PRRSV的多重RT-PCR检测方法的建立及应用[J].中国预防兽医学报,2012(10):810-814. |
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| 作者姓名： | 施开创 莫胜兰 张步娴 屈素洁 赵日浪 钟诚 |
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| 作者单位： | 广西动物疫病预防控制中心;广西大学动物科学技术学院 |
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| 基金项目： | 广西科学基金项目(桂科青0832057) |
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| 摘 要： | 为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速鉴别检测方法,本研究针对PRRSV基因序列设计3对特异性引物,即第1对通用引物扩增美洲型和欧洲型病毒株ORF7基因(433 bp/398 bp)、第2对引物扩增美洲型经典病毒株和高致病性变异株(HP-PRRSV)Nsp2基因(338 bp/248 bp)、第3对引物扩增欧洲型病毒株ORF5基因(614 bp)。经过反应条件的优化,建立了能够同时检测并区分美洲型经典病毒株、HP-PRRSV株以及欧洲型病毒株的多重RT-PCR检测方法。该方法可以特异扩增3种病毒的基因,其重组质粒标准品的检出下限均为1.67×103拷贝;而与猪的其它重要病原均无交叉反应。应用该方法检测176份临床疑似病料样品,结果 PRRSV阳性45份,其中美洲型变异病毒株41份、经典病毒株4份,未检测到欧洲型病毒株。表明本研究建立的多重RT-PCR检测方法可以用于PRRSV的快速鉴别诊断和流行病学调查。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲型病毒株 欧洲型病毒株 多重RT-PCR 检测方法 |
Establishment and application of a multiplex RT-PCR assay for differential detection of the North American genotype and the European genotype PRRSV |
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| SHI Kai-chuang,MO Sheng-lan,ZHANG Bu-xian,QU Su-jie,ZHAO Ri-lang,ZHONG Cheng.Establishment and application of a multiplex RT-PCR assay for differential detection of the North American genotype and the European genotype PRRSV[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2012(10):810-814. |
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| Authors: | SHI Kai-chuang MO Sheng-lan ZHANG Bu-xian QU Su-jie ZHAO Ri-lang ZHONG Cheng |
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| Institution: | 1.Guangxi Center for Animal Disease Control and Prevention,Nanning 530001,China; 2.College of Animal Science and Technology,Guangxi University,Nanning 530005,China) |
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