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猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究
引用本文:张浩吉,谢明权,张健騑,蒲文珺,覃宗华,蔡建平,王政富,顾万军.猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究[J].畜牧兽医学报,2007,38(2):184-189.
作者姓名:张浩吉  谢明权  张健騑  蒲文珺  覃宗华  蔡建平  王政富  顾万军
作者单位:1. 佛山科学技术学院动物医学系,佛山,528231
2. 广东省农科院兽医研究所,广州,510460
基金项目:广东省农业攻关计划项目(2005820201008);广东省自然科学基金项目(020388)
摘    要:以猪附红细胞体和多种血营养菌16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/HM-r,在反向引物的5′端用生物素标记,以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针,探针的5′端用地高辛标记,成功地建立了猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法。通过测定不同浓度PCR产物对应的微孔板杂交-酶反应显色OD值,用SPSS统计软件进行回归分析,得到回归方程为y=2.1012-0.4492×logx,其相关系数R为0.977,显示对未知样品可进行定量检测。该方法与猪的多种细菌性病原、猫血巴尔通氏体CA株和E.wenyonii无交叉反应,其敏感性比常规PCR琼脂糖电泳检测提高了近100倍。用建立的方法对38份临床样品进行检测,结果有12份检测结果为阳性。

关 键 词:猪附红细胞体  PCR  微孔板杂交  检测
文章编号:0366-6964(2007)02-0184-06
修稿时间:2006-04-24

Study on PCR-Microtiter Plate Hybridization Assay for Detection of Eperythrozoon suis
ZHANG Hao-ji,XIE Ming-quan,ZHANG Jian-fei,PU Wen-jun,QIN Zong-hua,CAI Jian-ping,WANG Zheng-fu,GU Wan-jun.Study on PCR-Microtiter Plate Hybridization Assay for Detection of Eperythrozoon suis[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2007,38(2):184-189.
Authors:ZHANG Hao-ji  XIE Ming-quan  ZHANG Jian-fei  PU Wen-jun  QIN Zong-hua  CAI Jian-ping  WANG Zheng-fu  GU Wan-jun
Institution:1. Department of Animal Medic Foshan 528231, China; 2. Institut of Agricultural Scien ine , Foshan Science and Technology College, e of Veterinary Science, Guangdong Academy ces, Guangzhou 510640, China
Abstract:
Keywords:E  suis  PCR  microtiter plate hybridization  detection
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