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猪圆环病毒2型Rep蛋白ELISA抗体检测方法的建立
引用本文:李杰,葛猛,罗维,舒晓亮,蒋大良,李润成,李波,刘国华,余兴龙.猪圆环病毒2型Rep蛋白ELISA抗体检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2012,34(11).
作者姓名:李杰  葛猛  罗维  舒晓亮  蒋大良  李润成  李波  刘国华  余兴龙
作者单位:1. 湖南农业大学动物医学院,湖南长沙 410128;怀化市动物防疫监督站,湖南怀化 418000
2. 湖南农业大学动物医学院,湖南长沙,410128
3. 怀化市动物防疫监督站,湖南怀化,418000
基金项目:湖南省科技重大专项,湖南农业大学人才引进基金
摘    要:为建立一种快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的方法,本研究通过基因合成PCV2的Rep编码序列,将其克隆至pET-28a(+)并在E.coli中表达,表达的重组Rep蛋白经Ni2+亲和纯化.采用纯化的目的蛋白作为包被抗原,建立检测PCV2 Rep蛋白抗体的间接ELISA方法.结果表明最佳抗原包被浓度为200 ng/孔,血清和二抗最佳反应时间分别为1h和30 min.该方法具有良好的特异性和敏感性,与韩国金诺公司试剂盒的符合率为81.4%,表明建立的ELISA方法可以用于PCV2的流行病学检测.

关 键 词:猪圆环病毒  Rep蛋白  原核表达  间接ELISA

Development of an indirect ELISA for detecting antibodies against porcine circovirus 2 based on recombinant Rep protein
LI Jie,GE Meng,LUO Wei,SHU Xiao-liang,JIANG Da-liang,LI Run-cheng,LI Bo,LIU Guo-hua,YU Xing-long.Development of an indirect ELISA for detecting antibodies against porcine circovirus 2 based on recombinant Rep protein[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2012,34(11).
Authors:LI Jie  GE Meng  LUO Wei  SHU Xiao-liang  JIANG Da-liang  LI Run-cheng  LI Bo  LIU Guo-hua  YU Xing-long
Abstract:
Keywords:
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