黄花菜八氢番茄红素脱氢酶基因HcPDS的克隆及VIGS转化表达验证 |
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作者单位: | 山西农业大学 园艺学院/山西省设施园艺工程技术中心,山西 太谷 030801;大同黄花产业发展研究院,山西大同 037004;山西农业大学 园艺学院/山西省设施园艺工程技术中心,山西 太谷 030801;大同黄花产业发展研究院,山西大同 037004;山西农业大学 园艺学院/山西省设施园艺工程技术中心,山西 太谷 030801;大同黄花产业发展研究院,山西大同 037004;山西农业大学 园艺学院/山西省设施园艺工程技术中心,山西 太谷 030801;大同黄花产业发展研究院,山西大同 037004;山西农业大学 园艺学院/山西省设施园艺工程技术中心,山西 太谷 030801;大同黄花产业发展研究院,山西大同 037004;山西农业大学 园艺学院/山西省设施园艺工程技术中心,山西 太谷 030801;大同黄花产业发展研究院,山西大同 037004;山西农业大学 园艺学院/山西省设施园艺工程技术中心,山西 太谷 030801;大同黄花产业发展研究院,山西大同 037004;山西农业大学 园艺学院/山西省设施园艺工程技术中心,山西 太谷 030801;大同黄花产业发展研究院,山西大同 037004 |
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基金项目: | 山西省高等学校科技创新项目;山西省农业重点研发计划重点项目;山西省农业重点研发计划重点项目;山西农业大学青年拔尖创新人才支持计划 |
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摘 要: | 为了拓宽对黄花菜基因功能研究的技术体系,本研究以黄花菜‘大同黄花’为试验材料,基于转录组数据库检索和PCR技术克隆得到了黄花菜HcPDS基因完整编码序列,序列全长1710 bp,编码570个氨基酸。该基因编码的蛋白质具有PDS基因家族典型的Phytoene desat结构域,分子量为63.719 72 kD,等电点为7.53,是亲水不稳定性蛋白。通过序列比对,发现HcPDS基因与水仙、芦笋等植物中的PDS基因具有较高的同源性。通过构建黄花菜病毒诱导的基因沉默(VIGS)体系,黄花菜幼苗被侵染后,接种pTRV2-HcPDS的植株新叶出现不完全的光漂白现象,叶片中的HcPDS基因表达量相比接种TRV2空载的阴性对照和空白对照植株分别下降了73.33%和71.72%。空白对照和阴性对照植株叶片则无光漂白现象出现,且空白对照和阴性对照的HcPDS基因表达量相比无显著差异。所构建的黄花菜VIGS体系可有效沉默HcPDS基因,为黄花菜功能基因的鉴定与分析奠定了技术基础。
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关 键 词: | 黄花菜 基因克隆 病毒诱导的基因沉默 表达鉴定 |
Cloning of phytoene dehydrogenase gene HcPDS from daylily and verification of VIGS transformation and expression |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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