| 中国斗鸡DJ-1基因克隆与原核、真核表达研究 |
| |
| 引用本文： | 冯宝刚,朱超,王会,武珅,娜日苏,卢晟盛,关伟军.中国斗鸡DJ-1基因克隆与原核、真核表达研究[J].中国畜牧兽医,2010,37(5). |
| |
| 作者姓名： | 冯宝刚 朱超 王会 武珅 娜日苏 卢晟盛 关伟军 |
| |
| 作者单位： | 冯宝刚,朱超,FENG Bao-gang,ZHU Chao(广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193);王会,武珅,娜日苏,关伟军,WANG Hui,WU Shen,NA Ri-su,GUAN Wei-jun(中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193);卢晟盛,LU Sheng-sheng(广西大学动物科学技术学院,南宁,530004) |
| |
| 基金项目： | 国家科技支撑项目，国家科技支撑项目，转基因生物新品种培育科技重大专项 |
| |
| 摘 要： | 本研究以中国斗鸡λ噬菌体cDNA文库为模板,克隆了DJ-1基因,并构建了pGEX-4T-1-DJ-1原核表达载体和pEGFP-N3-DJ-1真核表达载体,前者用来研究DJ-1蛋白在大肠杆菌表达系统中的优化表达;后者用来转染成纤维细胞系,研究DJ-1蛋白的亚细胞定位和建立转DJ-1基因的细胞模型。试验成功克隆了DJ-1基因的CDS区,并将其定向插入到pGEX-4T-1原核表达载体和pEGFP-N3真核表达载体中。IPTG浓度梯度诱导原核表达结果显示,在0.8mmol/L时DJ-1蛋白表达量最高;时间梯度结果显示,在8h时DJ-1蛋白表达量最高;真核表达载体转染脂尾羊成纤维细胞后48h阳性率最高,DJ-1蛋白在细胞核和胞质中均有表达,但胞质中居多。上述结果表明,本试验已经建立了稳定的DJ-1蛋白的真核、原核优化的表达系统,为进一步研究DJ-1基因的功能奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 中国斗鸡 克隆 真核表达 原核表达 |
The Research of Cloning Prokaryotic Expression and Eukaryotic Expression of DJ-1 Gene from Chinese Gamecock |
| |
| FENG Bao-gang,ZHU Chao,WANG Hui,WU Shen,NA Ri-su,LU Sheng-sheng,GUAN Wei-jun.The Research of Cloning Prokaryotic Expression and Eukaryotic Expression of DJ-1 Gene from Chinese Gamecock[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2010,37(5). |
| |
| Authors: | FENG Bao-gang ZHU Chao WANG Hui WU Shen NA Ri-su LU Sheng-sheng GUAN Wei-jun |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | DJ-1 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
