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| 鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白原核表达载体的构建 | |
| 作者单位： | 广州市华南农大生物药品有限公司,广东广州511300;广州市华南农大生物药品有限公司,广东广州511300;华南农业大学,广东广州510642 |
| 摘 要： | 本研究旨在构建鸡传染性支气管炎病毒(IBV)原核表达体系,制备其S1目的蛋白,为建立IBV ELISA检测方法奠定基础。以IBV QX型基因为模板,PCR扩增出S1蛋白基因,连接至p ET-32a原核表达载体,获得重组质粒p ET(32a)-S1,将重组质粒转入大肠杆菌BL21感受态细胞后进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析结果表明,重组S1蛋白在大肠杆菌BL21中获得表达,分子量约为60 k Da。Western-blot分析表明,重组蛋白能与Anti-His标签抗体发生特异性反应。利用Kcl染色法,成功纯化S1目的蛋白。本研究成功构建了p ET(32a)-S1重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,为进一步制备S1蛋白抗体奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 鸡传染性支气管炎病毒 原核表达 S1蛋白 蛋白纯化 |
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