| 洪湖碘泡虫PCR检测方法的建立与初步应用 |
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| 引用本文： | 李丹,柳阳,翟艳花,顾泽茂.洪湖碘泡虫PCR检测方法的建立与初步应用[J].淡水渔业,2017,47(1):12-16. |
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| 作者姓名： | 李丹 柳阳 翟艳花 顾泽茂 |
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| 作者单位： | 华中农业大学水产学院，武汉430070; 淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心，武汉430070; 农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉430070 |
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| 摘 要： | 为建立一种灵敏、特异的快速检测异育银鲫寄生洪湖碘泡虫(Myxobolus honghuensis)的方法,本研究根据洪湖碘泡虫ITS-5.8S r DNA基因序列筛选出一对特异性引物Mh F/R,建立PCR检测方法,对反应条件进行优化,并通过特异性试验、灵敏性试验与临床检测验证其可行性。结果显示,建立的PCR检测方法能特异性扩增洪湖碘泡虫相应的基因片段,长度为479 bp,而对试验中其他9种粘孢子虫的扩增结果均为阴性;最低能检测0.1 pg的虫体基因组DNA。通过临床样品检测,PCR方法比显微镜检测的检出率提高了19.5%。结果表明,该PCR方法特异、灵敏,适用于洪湖碘泡虫的快速检测。
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| 关 键 词： | 洪湖碘泡虫(Myxobolus honghuensis) ITS-5.8S rDNA PCR检测 显微镜检测 |
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