| 青枯菌M5菌株特异基因组消减文库的构建 |
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| 引用本文： | 李双双,孙晓甜,翟静娟,郜刚,闫桂琴.青枯菌M5菌株特异基因组消减文库的构建[J].中国农学通报,2008,24(3):62-66. |
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| 作者姓名： | 李双双 孙晓甜 翟静娟 郜刚 闫桂琴 |
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| 作者单位： | 1. 山西师范大学生命科学学院生物多样性研究所,山西临汾,041004
2. 中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101 |
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| 摘 要： | 为筛选青枯菌M5菌株特有的序列,利用SSH技术对青枯菌生理小种5号菌株M5（tester）和生理小种1号菌株GMI1000（driver）基因组进行了比较。分别提取二者基因组DNA,RsaⅠ酶切,将酶切后M5菌株DNA分为两份,分别与接头1和接头2R连接,然后进行两轮杂交和两轮PCR扩增,并检测连接效率与消减效率。将获得的消减PCR产物,即差异基因/差异DNA片段,与pGEM-T载体连接,转化E.coli DH5α感受态细胞,建立消减文库。随机挑取96个白色克隆,经菌液PCR法测定,80个为预期阳性,含有预期的插入片段。首次构建了青枯菌M5菌株特异基因的抑制消减文库,为进一步筛选、克隆青枯菌M5菌株特异核苷酸片段奠定了基础。
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| 关 键 词： | 青枯菌 抑制消减杂交 文库 基因组 青枯菌 菌株 基因组消减文库 Ralstonia solanacearum Gene Library 核苷酸 特异基因 插入片段 阳性 预期 测定 菌液 克隆 挑取 随机 感受态细胞 coli 转化 载体 差异基因 |
| 修稿时间： | 2007年12月27 |
Construction of a Subtracted Gene Library of Ralstonia solanacearum M5 |
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| Li Shuangshuang,Sun Xiaotian,Zhai Jingjuan,Gao gang,Yan Guiqin.Construction of a Subtracted Gene Library of Ralstonia solanacearum M5[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2008,24(3):62-66. |
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| Authors: | Li Shuangshuang Sun Xiaotian Zhai Jingjuan Gao gang Yan Guiqin |
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