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伪狂犬病病毒闽A株gE主要抗原表位基因在大肠杆菌中的克隆与表达
引用本文:黄毓茂,黄培堂,费恩阁.伪狂犬病病毒闽A株gE主要抗原表位基因在大肠杆菌中的克隆与表达[J].中国兽医学报,2002,22(2):146-148.
作者姓名:黄毓茂  黄培堂  费恩阁
作者单位:1. 华南农业大学动物医学系,广东,广州,510642
2. 军事医学科学院生物工程所,北京,100071
3. 解放军军需大学,动物科技系,吉林,长春,130062
基金项目:广东省自然科学基金资助项目 ( 940 35 2)
摘    要:根据伪狂犬病病毒 Rise毒株 g E基因序列 ,设计合成 1对引物 ,采用 PCR方法 ,从伪狂犬病病毒闽 A株 DNA扩增出 5 5 8bp片段。将该片段克隆到 p UC19质粒中 ,测序正确后再将其克隆到表达质粒 p ET- 2 8a中 ,以 BL 2 1(DE3)为宿主菌 ,在 IPTG诱导下获得了高效表达。经 SDS- PAGE及 Western- blotting鉴定分析 ,表达蛋白大小约 2 30 0 0 ,蛋白薄层扫描分析表明 ,该蛋白约占菌体总蛋白的 30 %。

关 键 词:伪狂犬病病毒闽A株  gE基因  大肠杆菌  基因表达
文章编号:1005-4545(2002)02-0146-03
修稿时间:2000年12月17

Cloning and Expression of Pseudorabies Virus Ma Strain's gE Main Epitopes in E.coli
HUANG Yu-mao ,HUANG Pei-tang ,FEI En-ge.Cloning and Expression of Pseudorabies Virus Ma Strain's gE Main Epitopes in E.coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2002,22(2):146-148.
Authors:HUANG Yu-mao  HUANG Pei-tang  FEI En-ge
Institution:HUANG Yu-mao 1,HUANG Pei-tang 2,FEI En-ge 3
Abstract:A 558 bp fragment encoding gE main epitopes of PRV Ma strain was obtained by PCR.This fragment was inserted into cloning vector pUC19 and sequenced,then,the correct gE sequence was introduced into expression vector pET-28a,controlled by T7 promotor.At last,the recombinant plasmid was transformed into E.coli BL21(DE3) and induced with IPTG to express encoded proteins.By analysis of SDS-PAGE and Western-blotting,an expression gE peptide about 23 000 was confirmed and made up of 30% of the total bacteria proteins.
Keywords:Pseudorabies virus Ma strain  gE gene  E  coli  gene expression  
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