重组人γ-干扰素表达菌株的构建及纯化 |
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引用本文: | 许崇利.重组人γ-干扰素表达菌株的构建及纯化[J].中国兽药杂志,2011,45(1):16-19. |
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作者姓名: | 许崇利 |
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作者单位: | 吉林化工学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(面上项目,重点项目,重大项目) |
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摘 要: | 从健康人外周血分离单核细胞,并提取总RNA,利用RT-PCR扩增出hIFN-γ基因。构建了重组表达菌株BL21(DE3)(pET32a(+)-hIFN-γ)。经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pET32a(+)-hIFN-γ含有hIFN-γ基因,且基因序列和阅读框架正确。经W estern blot鉴定证实为hIFN-γ,并实现了在大肠杆菌中的高效表达。表达产物占菌体总蛋白的52%。同时对其抗病毒活性进行了测定,从而为hIFN-γ的生物活性和生产工艺研究提供了可靠的试验数据。
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关 键 词: | 大肠杆菌 hIFN-γ基因 反转录聚合酶链反应 基因表达 纯化 |
收稿时间: | 2010/6/26 0:00:00 |
修稿时间: | 2010/11/26 0:00:00 |
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