小鼠IL-1β、TNF-αTaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及脑心肌炎病毒感染小鼠的检测 |
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引用本文: | 陈宏备,施开创,李向涛,郑敏,郑喜邦,李军.小鼠IL-1β、TNF-αTaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及脑心肌炎病毒感染小鼠的检测[J].中国预防兽医学报,2011,33(7). |
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作者姓名: | 陈宏备 施开创 李向涛 郑敏 郑喜邦 李军 |
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作者单位: | 1. 广西大学 动物科学技术学院,广西南宁,530005 2. 广西动物疫病预防控制中心,广西南宁,530001 |
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基金项目: | 广西科学基金项目,广西科技创新能力与条件建设基金项目 |
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摘 要: | 为探讨脑心肌炎病毒(EMCV)感染后促炎细胞因子的表达水平、从分子水平深入研究EMCV的致病机制,本研究分别建立了检测小鼠IL-1β、TNF-α和管家基因β-actin的TaqMan real-time PCR检测方法.该方法标准曲线的相关系数均达到0.998以上,检出下限均达到10 copies/μL质粒标准品,组内与组间的变异系数均小于2%.应用该方法对猪源EMCV GXLC株人工感染小鼠的脑、心、脾中IL-1 β、TNF-α mRNA的转录水平进行检测,发现感染后第4d IL-1β、TNF-α mRNA的转录水平达到峰值,并且与小鼠发病死亡高峰存在明显的时间相关性.本研究所建立的TaqMan real-time PCR检测方法为小鼠促炎细胞因子的检测及定量分析提供了技术手段.
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关 键 词: | 脑心肌炎病毒 小鼠 促炎细胞因子 荧光定量RT-PCR |
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