犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子生物学特性鉴定 |
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引用本文: | 王长江,沈志强,金婷婷,武曰星,刘慧,曲光刚.犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子生物学特性鉴定[J].中国兽药杂志,2017,51(9):18-23. |
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作者姓名: | 王长江 沈志强 金婷婷 武曰星 刘慧 曲光刚 |
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作者单位: | 山东绿都生物科技有限公司,,,,,山东省滨州畜牧兽医研究院 |
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基金项目: | 山东省自然科学基金资助项目(ZR2013CQ004) |
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摘 要: | 目的 通过原核系统表达犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子(NcMIF),并对该蛋白的免疫调节作用进行分析。方法 通过GenBank发表的序列,利用分子生物学软件设计了一对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增出NcMIF全基因,经测序分析后,将NcMIF亚克隆到原核表达载体pET28a(+),然后将鉴定为阳性的重组质粒转化到E. coli BL21(DE3)中用IPTG进行诱导表达。利用HPLC对可溶性表达的重组NcMIF蛋白进行纯化,去除内毒素,最后对NcMIF的免疫调节作用进行鉴定。结果 NcMIF没有明显的抗糖皮质激素的免疫抑制作用,也没有上调巨噬细胞TNF-α和NO表达量的作用。结论 实现了NcMIF在大肠杆菌系统中的可溶性表达并对其功能进行了鉴定,为进一步探究NcMIF生物学功能及其MIF在宿主免疫调节中的作用奠定基础。
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关 键 词: | 犬新孢子虫 巨噬细胞转移抑制因子 原核表达 免疫调节 |
收稿时间: | 2017/6/26 0:00:00 |
修稿时间: | 2017/7/6 0:00:00 |
Cloning, Expression and Immunoregulatory Activities Identification of Macrophage Migration Inhibitory Factor Derived from Neospora Canine |
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Institution: | Shandong LvDu Bio-Science and Technology Co,LTD,Shandong Binzhou,,,,, |
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Abstract: | |
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Keywords: | Neospora Canine Macrophage Migration Inhibitory Factor Prokaryotic expression Immunoregulatory |
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