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犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子生物学特性鉴定
引用本文:王长江,沈志强,金婷婷,武曰星,刘慧,曲光刚.犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子生物学特性鉴定[J].中国兽药杂志,2017,51(9):18-23.
作者姓名:王长江  沈志强  金婷婷  武曰星  刘慧  曲光刚
作者单位:山东绿都生物科技有限公司,,,,,山东省滨州畜牧兽医研究院
基金项目:山东省自然科学基金资助项目(ZR2013CQ004)
摘    要:目的 通过原核系统表达犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子(NcMIF),并对该蛋白的免疫调节作用进行分析。方法 通过GenBank发表的序列,利用分子生物学软件设计了一对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增出NcMIF全基因,经测序分析后,将NcMIF亚克隆到原核表达载体pET28a(+),然后将鉴定为阳性的重组质粒转化到E. coli BL21(DE3)中用IPTG进行诱导表达。利用HPLC对可溶性表达的重组NcMIF蛋白进行纯化,去除内毒素,最后对NcMIF的免疫调节作用进行鉴定。结果 NcMIF没有明显的抗糖皮质激素的免疫抑制作用,也没有上调巨噬细胞TNF-α和NO表达量的作用。结论 实现了NcMIF在大肠杆菌系统中的可溶性表达并对其功能进行了鉴定,为进一步探究NcMIF生物学功能及其MIF在宿主免疫调节中的作用奠定基础。

关 键 词:犬新孢子虫  巨噬细胞转移抑制因子  原核表达    免疫调节
收稿时间:2017/6/26 0:00:00
修稿时间:2017/7/6 0:00:00

Cloning, Expression and Immunoregulatory Activities Identification of Macrophage Migration Inhibitory Factor Derived from Neospora Canine
Institution:Shandong LvDu Bio-Science and Technology Co,LTD,Shandong Binzhou,,,,,
Abstract:
Keywords:Neospora Canine  Macrophage Migration Inhibitory Factor  Prokaryotic expression  Immunoregulatory
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