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| 双抗体夹心ELISA检测小反刍兽疫病毒抗原方法的建立及病原流行病学调查 | |
| 作者单位： | ;1.吉林大学动物医学学院;2.吉林大学教育部人兽共患病研究所 |
| 摘 要： | 应用表达纯化的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)N蛋白制备的多克隆抗体,建立了检测PPRV抗原的双抗体夹心ELISA方法,并对吉林省和内蒙古地区羊群感染PPRV进行了调查。方阵法确定了抗PPRV兔源IgG作为捕获抗体的包被量为0.2μg,酶标抗体的最佳稀释度为1∶1 000。对大量小反刍兽疫阴性粪便样品进行检测及统计学处理,确定了双抗体夹心ELISA检测PPRV的判定标准,即被检粪便样品D490≥0.221,判定为阳性。特异性、敏感性等试验结果表明,建立的检测PPRV抗原方法具有特异、敏感和快速等优点。与RT-PCR方法相比,该方法省时省力、简单快速。应用建立的检测PPRV抗原的双抗体夹心ELISA对吉林省和内蒙古不同地区的羊粪样进行检测,发现羊群均存在程度不同的PPRV隐性感染。本研究在国内首次揭示出临床健康羊群携带PPRV,为今后小反刍兽疫的诊断与防控提供了新的流行病学理论依据。 |
| 关 键 词： | PPRV 小反刍兽疫 双抗体夹心ELISA 隐性感染 流行病学调查 |
Development of a direct sandwich ELISA for PPRV antigen detection and its application in PPRV epidemiological investigation |
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