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| 重组产气荚膜梭菌plc毒素基因植物乳酸杆菌的构建 | |
| 作者单位： | ;1.黑龙江省兽医科学研究所;2.东北农业大学动物医学学院;3.黑龙江省讷河市动物防疫站 |
| 摘 要： | 依据乳酸菌的肠道益生作用,选择产气荚膜梭菌关键致病因子α毒素/磷脂酶C为抗原,构建产气荚膜梭菌α毒素去除信号肽的plc基因片段重组植物乳杆菌,利用植物乳酸菌穿梭载体pSIP409构建重组质粒pSIP409-plc,经双酶切鉴定和序列测定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并进行SppIP诱导表达。Western Blot证明重组蛋白表达成功,并且主要以包涵体形式存在,plc重组蛋白相对分子质量分别为40 kDa。重组质粒pSIP409-plc分别电转化植物乳杆菌NC8细胞,PCR和双酶切鉴定正确后进行SppIP诱导表达。Western Blot和间接免疫荧光鉴定表明,构建的重组植物乳酸杆菌具有诱导分泌plc蛋白的能力,可作为黏膜免疫的候选抗原。 |
| 关 键 词： | 产气荚膜梭菌 plc基因 植物乳酸杆菌 表达 |
Construction of recombinant Lactobacillus plantarum containing plc gene of Clostridium perfringens |
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