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| 禽流感病毒AM2蛋白相互作用宿主蛋白的筛选及初步验证 | |
| 作者单位： | ;1.吉林农业大学动物科学技术学院;2.吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室 |
| 摘 要： | 采用酵母双杂交系统筛选与禽流感病毒AM2相互作用的宿主蛋白,可为研究AM2蛋白的生物学新功能提供依据。将检测无毒性与自激活作用的诱饵质粒pGBKT7-AM2与淋巴文库质粒进行融合杂交,然后对经选择性培养基筛选到的阳性克隆进行酶切鉴定和测序分析,阳性克隆进行酵母回转试验验证。经酵母双杂交筛选与验证最终获得2个与AM2相互作用的蛋白。选择线粒体细胞色素C氧化酶亚单位Ⅱ(COXⅡ)蛋白进行进一步研究,构建真核表达载体pcDNA3.0-HA-COXⅡ,并进行GST-pull down和免疫荧光试验验证。结果表明,COXⅡ与AM2存在相互作用,且在细胞质中存在共定位现象,为进一步研究禽流感病毒的致病机理和病毒-宿主相互作用机制提供了理论基础。 |
| 关 键 词： | 禽流感病毒 AM2蛋白 酵母双杂交 COXⅡ蛋白 共定位 |
Screening and preliminary identification of host proteins interacting with avian influenza virus AM2 protein |
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