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| 脑心肌炎病毒BD2株VP1基因的原核表达及生物信息学分析 | |
| 作者单位： | ;1.河北农业大学动物医学院;2.河北省兽医生物技术工程技术研究中心;3.农业部动物疫病病原生物学华北区观测实验站 |
| 摘 要： | 应用RT-PCR技术扩增脑心肌炎病毒(EMCV)BD2株VP1基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+),利用在线分析软件对该基因所编码的蛋白序列进行生物信息学分析。将重组质粒pET-32a-VP1转化到E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,在不同浓度的IPTG和不同温度条件下对目的蛋白进行诱导表达。结果显示,EMCV VP1基因全长831bp,编码277个氨基酸,VP1蛋白为酸性、亲水性蛋白质,蛋白空间结构以α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲为主。经SDS-PAGE分析可知,VP1蛋白在37℃,1.0mmol/L IPTG的诱导条件下以包涵体形式获得了高效表达,重组蛋白的相对分子质量约为49 300。Western blot结果表明其具有良好的反应原性。综上所述,EMCV VP1蛋白是一种抗原性较高的亲水性蛋白,在原核系统中能高效表达,该研究为进一步建立相应的抗体检测方法和DNA疫苗的研制提供理论基础。 |
| 关 键 词： | 脑心肌炎病毒 VP1基因 原核表达 生物信息学分析 |
Prokaryotic expression and bioinformatics analysis of VP1 gene of encephalomyocarditis virus strain BD2 |
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