| 嗜水气单胞菌气溶素的原核表达及其多克隆抗血清的制备 |
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| 引用本文： | 杜娜,顾泽茂,袁军法,林蠡,翟艳花,刘学芹,罗宇良.嗜水气单胞菌气溶素的原核表达及其多克隆抗血清的制备[J].华中农业大学学报,2014,33(3):65-71. |
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| 作者姓名： | 杜娜 顾泽茂 袁军法 林蠡 翟艳花 刘学芹 罗宇良 |
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| 作者单位： | 华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心/农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉 430070;华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心/农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉 430070;华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心/农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉 430070;华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心/农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉 430070;华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心/农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉 430070;华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心/农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉 430070;华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心/农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉 430070 |
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| 基金项目： | 湖北省杰出青年人才基金项目（2011CDA091）和中央高校基本科研业务费专项（2013PY023,2013PY069,2013PY070,2013 PY071） |
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| 摘 要： | 根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)气溶素(aerolysin,Aer)基因的序列设计引物,以来自湖北的鱼源A.hydrophila分离株为模板扩增出aer基因的ORF序列,克隆到pMD18-T载体上进行序列测定。测序结果表明,A.hydrophila的aer基因的系统进化树中国内菌株聚为一支,国外菌株聚为一支。通过pET-32a(+)载体构建Ah15株aer基因的表达载体pET32a-15,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行诱导表达,通过SDS-PAGE分析,显示与预期大小约72.2ku相吻合的融合蛋白带,且以包涵体形式存在。浓缩后的包涵体蛋白免疫新西兰大白兔获得了重组蛋白的抗血清,Western blot结果显示,兔抗血清可以识别A.hydrophila的重组毒素,说明该基因的重组蛋白具有很好的免疫原性,可作为A.hydrophila基因工程疫苗研制的候选基因。
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| 关 键 词： | 嗜水气单胞菌 气溶素 原核表达 多克隆抗血清 |
| 收稿时间： | 2013/5/26 0:00:00 |
Prokaryotic expression and polyclonal antiserum preparation of aerolysin of Aeromonas hydrophila |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aeromonas hydrophila aerolysin prokaryotic expression polyclonalantiserum |
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