荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌方法的建立及应用 |
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引用本文: | 郭梦冉,董兵,李聪,李志辉,王庆平,张伟,檀建新.荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌方法的建立及应用[J].河北农业大学学报,2018(3). |
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作者姓名: | 郭梦冉 董兵 李聪 李志辉 王庆平 张伟 檀建新 |
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作者单位: | 河北农业大学食品科技学院/河北省农产品加工工程技术中心;河北农业大学理工学院 |
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摘 要: | 为了检测食品中金黄色葡萄球菌,建立一种基于SYBR GreenⅡ染料的实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测方法。根据金黄色葡萄球菌nuc基因,设计特异引物,优化引物退火温度,检测了特异性和灵敏性,建立了荧光定量PCR检测方法,并利用此方法对肉类和乳制品中的金黄色葡萄球菌进行检测。结果表明:建立qPCR方法具有很好的特异性,其灵敏度可达到3.5×101 CFU/mL,检测到的循环阈值(Cycle threshold,Ct)与金黄色葡萄球菌菌液浓度有良好的线性方程,相关系数R2为0.9997,在肉类和乳制品中金黄色葡萄菌的检测限分别为4.0×101,3.5×101 CFU/mL。试验证明建立的荧光定量PCR检测方法能够快速准确地检测食品中的金黄色葡萄球菌。
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