| 酵母和人剪接因子Prp5在家蚕中部丝腺的表达 |
| |
| 引用本文： | 李文萃,黄俊逸,徐永镇,孙霞.酵母和人剪接因子Prp5在家蚕中部丝腺的表达[J].蚕业科学,2018,44(4):530-536. |
| |
| 作者姓名： | 李文萃 黄俊逸 徐永镇 孙霞 |
| |
| 作者单位： | 上海大学生命科学学院,上海,200000;中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态学研究所,上海,200032;江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,江苏镇江212018 |
| |
| 基金项目： | 中国科学院重点部署项目 |
| |
| 摘 要： | 剪接因子Prp5是一种三磷酸腺苷(ATP)水解酶/RNA解旋酶,在内含子的识别和预剪接体的组装过程中具有重要的调控作用。分别克隆了酵母(Saccharomyces cerevisiae)与人(Homo sapiens)Prp5蛋白的核心编码序列Sc Prp5-M和h Prp5-M,然后在序列上游分别添加8×His标签序列,再与转基因质粒p Bac-Seri1-IE1ds Red(含seri1基因启动子和信号肽序列)进行重组,得到p Bac-Sc Prp5-M和p Bac-h Prp5-M转基因质粒。利用家蚕转基因技术将转基因质粒分别注射到蚕卵中,通过串联红色荧光标记筛选阳性转基因家蚕,在基因组水平检测到有Sc Prp5-M和h Prp5-M插入的家蚕个体,进一步的RNA和蛋白质检测也证明2种外源蛋白在家蚕中部丝腺中特异性表达,并且在5龄第4天和第5天的表达量较高。此外,在家蚕中部丝腺表达的2种重组蛋白均能随丝蛋白分泌到体外存在于茧层中,经裂解和纯化后,每1 g鲜茧茧层可分别获得6.25μg重组Sc Prp5-M蛋白和12.5μg重组h Prp5-M蛋白。利用家蚕丝腺生物反应器表达外源Prp5蛋白,为进一步研究Prp5蛋白的功能奠定了一定的实验基础。
|
| 关 键 词： | 丝腺生物反应器 中部丝腺 转基因家蚕 外源蛋白 剪接因子 Prp5 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
