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万寿菊RAPD分子标记优化体系的建立
引用本文:沈一岚,续九如,李福荣,张继冲.万寿菊RAPD分子标记优化体系的建立[J].吉林林业科技,2006,35(1):10-14.
作者姓名:沈一岚  续九如  李福荣  张继冲
作者单位:北京林业大学生物学院,北京,100083
基金项目:北京林业大学研究生自选课题基金项目资助。
摘    要:以雄性不育和可育万寿菊及其子代为材料,在PE-2400型PCR仪上进行扩增,通过3次正交试验设计,优化得到了最佳的RAPD反应体系,确定了各个因素的最佳水平。在20 μL反应体系中,最佳的浓度配比为:10×Buffer中含10.00 mmol·L-1Tris-HCl、50.00 mmol·L-KCl、0.001%gelatin、dNTP0.25 mmol· L-1、TaqDNA聚合酶1.5 U、MgCl2 1.25 mmol·L-1、DNA20-60 ng、引物0.60 pmol·μL-1,预变性时间5 min, 退火温度37℃较好,1 min的延伸时间也满足了2 kb以下的DNA片段合成,循环35次能得到较好的 RAPD图谱。

关 键 词:万寿菊  RAPD  反应体系  正交设计
文章编号:1005-7129(2006)01-0010-05
收稿时间:2005-10-28
修稿时间:2005年10月28

RAPD experiment protocol and optimization in marigold
Shen Yi-lan,Xu Jiu-ru,Li Fu-rong,Zhang Ji-chong.RAPD experiment protocol and optimization in marigold[J].Jilin Forestry Scicnce and Technology,2006,35(1):10-14.
Authors:Shen Yi-lan  Xu Jiu-ru  Li Fu-rong  Zhang Ji-chong
Abstract:
Keywords:marigold  RAPD  reaction conditions  orthogonal design
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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