微小隐孢子虫LCCL结构域基因的克隆及原核表达 |
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引用本文: | 宁良辰,张颖,赵权.微小隐孢子虫LCCL结构域基因的克隆及原核表达[J].动物医学进展,2013(3):68-71. |
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作者姓名: | 宁良辰 张颖 赵权 |
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作者单位: | 吉林农业大学动物科技学院 |
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摘 要: | 为探讨微小隐孢子虫的入侵机制,克隆、表达了微小隐孢子虫LCCL结构域基因。从已构建的微小隐孢子虫cDNA文库中,采用PCR随机扩增LCCL结构域基因。与Pmd-18-T载体连接后,挑取阳性重组子测序分析。用基因重组技术将LCCL结构域基因克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建LCCL结构域基因的重组原核表达载体pGEX-4T-1-LCCL。重组质粒经酶切、测序鉴定后转入大肠埃希菌BL21中,IPTG诱导表达目的蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。最终得到了在大肠埃希菌中高效表达的重组蛋白,分子质量大小约为37ku,并且具有反应原性,为进一步研究微小隐孢子虫的入侵机制奠定了基础。
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关 键 词: | 微小隐孢子虫 LCCL结构域基因 克隆 原核表达 |
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