| 嗜水气单胞菌转录调控蛋白基因(ahyR)突变株的构建及特性分析 |
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| 引用本文： | 毕志香,刘永杰.嗜水气单胞菌转录调控蛋白基因(ahyR)突变株的构建及特性分析[J].农业生物技术学报,2006,14(1):55-59. |
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| 作者姓名： | 毕志香 刘永杰 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目;教育部科研项目 |
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| 摘 要： | 根据GenBank公布的嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila,Ah)转录调控蛋白基因ahyR序列设计1对特异性引物,利用PCR方法扩增AhJ-1株ahyR的部分片段。PCR产物克隆入pMD18-T载体,经序列测定后定向连接入含有卡那霉素抗性(Kanr)基因的自杀性质粒pJP5603中,构建重组质粒pJP-ahyR。将鉴定为阳性的重组质粒转化嗜水气单胞菌J-1株感受态细胞,获得1突变株细菌。PCR方法鉴定该突变株为J-1株ahyR基因同源突变株,命名为J-1△ahyR。与J-1株相比,突变株的外膜蛋白图谱和部分生化特性发生改变;胞外蛋白酶、淀粉酶、DNA酶、溶血素等几种主要毒力因子同时丧失;致病力明显降低,对小白鼠的半数致死量大于1.0×108CFU(colonyformingunits)。该研究为ahyR基因功能的探讨及嗜水气单胞菌弱毒疫苗的研制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 嗜水气单胞菌 ahyR基因 同源重组 突变株构建 |
| 文章编号： | 1006-1304（2006）01-0055-05 |
| 收稿时间： | 2005-01-18 |
| 修稿时间： | 2005-05-16 |
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