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甜瓜化感自毒作用响应基因的cDNA-AFLP分析
引用本文:张志忠,孙志浩,陈文辉,林文雄.甜瓜化感自毒作用响应基因的cDNA-AFLP分析[J].中国生态农业学报,2012,20(11):1514-1520.
作者姓名:张志忠  孙志浩  陈文辉  林文雄
作者单位:福建农林大学园艺学院 福州 350002;福建农林大学园艺学院 福州 350002;福州市蔬菜科学研究所 福州 350012;福建农林大学作物学院 福州 350002
基金项目:国家科技支撑计划项目(2007BAD07B03)、福建省自然科学基金项目(2011J01083)和福建省博士后经费资助
摘    要:本研究以甜瓜种质"新银辉"为试验材料,利用浓度为0.03 g.mL 1的新鲜甜瓜植株水浸提液处理甜瓜幼苗,通过cDNA-AFLP技术分析甜瓜化感自毒作用相关基因及其表达情况。试验中利用82对引物进行扩增,共获得3 600多条差异表达转录衍生片段(TDFs),平均每个引物组合可扩增出30~50条条带,片段大小集中在50~800 bp之间,根据条带强弱和有无的变化,其表达模式可以分为持续表达、瞬时表达、上调表达和下调表达4种情况。选取其中103条TDFs进行回收、测序,共获得75条有效序列,其中上调表达39条,下调表达21条,瞬时表达15条。BLAST结果分析显示其中55条与已知功能基因具有较高的同源性,选取其中10条TDFs,以甜瓜Actin基因为内参照,对其在不同胁迫处理时间的表达情况进行半定量RT-PCR验证,分析结果与cDNA-AFLP结果基本吻合,表明cDNA-AFLP技术是研究甜瓜化感自毒作用相关基因差异表达的有效方法。55条TDFs的BLAST结果显示,甜瓜自毒作用涉及到的基因表达情况较为复杂,与信号转导、能量代谢、蛋白合成、离子运输、逆境响应和转录调控等过程均有关系,这一结果为探讨甜瓜化感自毒作用的分子机理和相关基因的克隆提供了理论依据。

关 键 词:甜瓜  化感自毒作用  cDNA-AFLP  差异表达转录衍生片段  半定量RT-PCR  化感基因
收稿时间:6/8/2012 12:00:00 AM
修稿时间:2012/8/29 0:00:00

Gene expression profiling in response to allelopathic autotoxicityin melon by cDNA-AFLP
ZHANG Zhi-Zhong,SUN Zhi-Hao,CHEN Wen-Hui and LIN Wen-Xiong.Gene expression profiling in response to allelopathic autotoxicityin melon by cDNA-AFLP[J].Chinese Journal of Eco-Agriculture,2012,20(11):1514-1520.
Authors:ZHANG Zhi-Zhong  SUN Zhi-Hao  CHEN Wen-Hui and LIN Wen-Xiong
Institution:College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China;College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China;Fuzhou Institute of Vegetable Research, Fuzhou 350012, China;College of Crop Sciences, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China
Abstract:
Keywords:
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