| 家蚕丝氨酸蛋白酶基因BmSP25转录分析及其免疫响应 |
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| 引用本文： | 张永红,朱峰,唐芬芬,邵榆岚,白兴荣.家蚕丝氨酸蛋白酶基因BmSP25转录分析及其免疫响应[J].南方农业学报,2017,48(6):1093-1098. |
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| 作者姓名： | 张永红 朱峰 唐芬芬 邵榆岚 白兴荣 |
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| 作者单位： | 云南省农业科学院 蚕桑蜜蜂研究所,云南 蒙自,661101 |
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| 基金项目： | 国家蚕桑产业技术体系建设专项项目，云南省现代农业蚕桑产业技术体系建设项目，云南农业科学院蚕桑蜜蜂研究所青年创新基金项目 |
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| 摘 要： | 目的]分析家蚕丝氨酸蛋白酶(SP)基因序列BmSP25及转录情况,明确其表达规律对防御家蚕核型多角体病毒(BmNPV)入侵的免疫应答机制,为揭示BmSPs在家蚕免疫应答方面的功能作用提供理论依据.方法]克隆BmSP25基因序列,对该基因编码蛋白的氨基酸序列、分子量、结构域等进行生物信息学分析;利用GeneDoc和MEGA 5.0对BmSP25氨基酸序列进行多序列比对及系统发育进化树分析,采用半定量RT-PCR对家蚕不同组织和发育时期的BmSP25基因转录情况进行分析,并以实时荧光定量PCR检测BmSP25基因在BmNPV感染家蚕中肠组织中的转录水平.结果]BmSP25基因的ORF全长885 bp,编码294个氨基酸,其中第1~17位氨基酸为信号肽,去信号肽的分子量为29.1 kD,理论等电点为7.8.BmSP25蛋白由4个α螺旋、15个β折叠和一些无规则卷曲构成;其氨基酸序列同源性比对分析发现,BmSP25(BGIBMGA008514-PA)与蓓带夜蛾SP序列(GenBank登录号ADM35105)的同源性最高,为62.1%.BmSP25基因在家蚕中肠组织中特异表达,且在整个幼虫时期呈持续性表达.BmSP25基因在家蚕感染BmNPV后发生明显变化,至感染6 h时呈下调趋势,而在感染3、12和24 h时均呈明显上调表达.结论]BmSP25在防御BmNPV入侵家蚕的免疫应答过程中发挥重要作用.鉴于昆虫SP具有高度保守的底物特异性位点,因此可利用底物类似物、基因定点突变等方式来预防农林害虫.
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| 关 键 词： | 家蚕 丝氨酸蛋白酶(SP)基因 表达 BmNPV感染 转录分析 |
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