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| 油茶随机扩增多态DNA条件的研究 | |
| 引用本文： | 张云,黄儒珠,刘大林,齐清琳,刘国敏,叶锋.油茶随机扩增多态DNA条件的研究[J].福建林业科技,2003,30(2):5-8,13. |
| 作者姓名： | 张云 黄儒珠 刘大林 齐清琳 刘国敏 叶锋 |
| 作者单位： | 1. 福建师范大学生物工程学院,福建,福州,350007 2. 福建省林业厅,福建,福州,350003 3. 福建闽侯桐口国有林场,福建,闽侯,350100 |
| 基金项目： | 福建省林业厅科技项目(C2002041) |
| 摘 要： | 以改进的CTAB法提取油茶嫩叶总DNA,进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,分别测试了Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度和TaqDNA聚合酶用量对反应结果的影响,确定了油茶RAPD分析的最适反应体系:在25μlPCR反应体积中,含20ng模板DNA,2 5mmol·L-1MgCl2,0 2mmol·L-1dNTP,0 3μmol·L-1引物,1UTaqDNA聚合酶。扩增程序为:94℃预变性180s;94℃变性60s,37℃退火90s,72℃延伸120s,反应40个循环;最后在72℃延伸5min。 |
| 关 键 词： | 油茶 随机扩增多态DNA 反应条件 |
| 文章编号： | 1002-7351(2003)02-0005-04 |
Study on the Random Amplified Polymorphic DNA Condition of Camellia oleifera |
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| Abstract: | The Camellia oleifera suitable reaction system analysed by RAPD was determined as follows:25 μl of PCR reaction volume contained 20 ng of template DNA,25mmol·L-1 of MgCl2,02mmol·L-1 of dNTP,03μmol·L-1 of primer,and 1U of Taq DNA polymerase.The augmentation procedure was:pre denaturation at 94℃ for 180s;denaturation at 94℃ for 60s;annealing at 37℃ for 90s;extension at 72℃ for 120s,reaction of 40 cycles;and extension at 72℃ for 5 minutes at last. |
| Keywords: | Camellia oleifera random amplified polymorphic DNA reaction condition |
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